糖尿病肾病中miRNA 5-甲基胞嘧啶修饰谱的特征及其免疫相关靶基因调控机制研究

本研究针对糖尿病肾病(DKD)中miRNA甲基化修饰与免疫调控的关联问题，通过Arraystar小RNA修饰芯片技术分析PBMCs中m5C修饰谱，结合WGCNA和免疫浸润分析，发现TGFBR2是miR-654-5p的m5C依赖性靶基因，揭示了表观遗传修饰通过调节免疫微环境影响DKD进展的机制，为早期干预提供新靶点。

　　

糖尿病肾病(DKD)已成为发展中国家终末期肾病(ESRD)的首要病因，其早期并发症风险显著增加患者死亡率。尽管已知微血管病变是主要特征，但表观遗传调控特别是miRNA的5-甲基胞嘧啶(m5C)修饰在免疫微环境失衡中的作用尚不明确。深圳市人民医院与广州华侨医院的研究团队通过分析患者外周血单个核细胞(PBMCs)的m5C修饰谱，发现这一修饰可能通过调控靶基因表达参与DKD进展。

研究采用Arraystar小RNA修饰芯片检测13例DKD患者与健康对照者PBMCs中1922种miRNA的m5C修饰水平，结合转录组数据开展免疫浸润分析和WGCNA网络构建，并通过MeRIP-qPCR和实时定量PCR验证关键靶基因。样本来源于符合美国糖尿病协会(ADA)2020年诊断标准的住院患者。

【背景】DKD患者PBMCs中整体miRNA m5C修饰水平降低，17种miRNA修饰上调而102种下调，涉及自噬、胰腺激素信号等通路。
【方法】差异修饰miRNA的靶基因预测显示，TGFBR2是miR-654-5p的潜在调控靶点。
【结果】免疫浸润揭示单核细胞和嗜酸性粒细胞比例异常，与经典免疫通路相关。WGCNA锁定单核细胞模块中TGFBR2为关键基因，验证实验显示miR-654-5p的m5C修饰降低与TGFBR2表达升高呈负相关，且DNMT3B/NSUN2表达模式支持m5C介导的调控机制。
【讨论】m5C修饰异常通过影响miR-654-5p等分子调控免疫细胞浸润，可能驱动DKD进展。TGFBR2作为关键靶点，其表达受miRNA甲基化状态动态调节。
【结论】该研究首次系统揭示DKD中miRNA m5C修饰特征与免疫调控网络的关联，为开发基于表观遗传修饰的早期诊断标志物和治疗策略提供理论依据。研究结果发表于《Gene》，凸显表观遗传-免疫互作在DKD发病中的核心地位。