长链非编码RNA MIR4435-2HG调控牙髓干细胞成骨分化及炎症反应的分子机制研究

本研究针对牙髓炎治疗中成骨分化障碍和炎症调控机制不明的关键问题，通过分析lncRNA MIR4435-2HG在牙髓干细胞(hDPSCs)中的功能。研究发现MIR4435-2HG通过负向调控miR-296-5p抑制成骨分化标志物(DMP-1/DSPP)表达，并促进LPS诱导的炎症因子(TNF-α/IL-6/IL-1β)释放。该成果为牙髓再生治疗提供了新靶点，发表于《International Dental Journal》。

　　

牙髓炎作为最常见的口腔疾病之一，其发病机制复杂且治疗手段有限。当龋齿等病因导致细菌入侵牙髓时，会引发剧烈的炎症反应和组织损伤。尽管根管治疗等技术不断进步，但治疗后牙齿易发生折裂等问题，严重影响患者生活质量。更棘手的是，牙髓干细胞(hDPSCs)的成骨分化能力在炎症环境中会受到抑制，这直接影响了牙本质的再生修复。近年来，长链非编码RNA(lncRNA)被发现在多种疾病中扮演重要角色，但它们在牙髓炎中的具体机制仍如"黑箱"般亟待探索。

长沙市口腔医院的研究团队将目光聚焦于lncRNA MIR4435-2HG。通过分析GSE92681数据集，他们发现这个分子在炎症牙髓组织中异常高表达。为了揭开它的神秘面纱，研究人员开展了一系列实验，最终发现MIR4435-2HG就像牙髓炎的"分子开关"，既能抑制hDPSCs的成骨分化，又能加剧炎症反应。这项重要成果发表在《International Dental Journal》上，为开发新型牙髓再生疗法提供了理论依据。

研究采用了多种关键技术：从35例不可逆性牙髓炎患者和18例正畸患者获取牙髓组织样本；通过实时定量PCR(RT-qPCR)检测基因表达；使用CCK-8法和流式细胞术分析细胞增殖与凋亡；借助双荧光素酶报告基因验证MIR4435-2HG与miR-296-5p的靶向关系；采用LPS诱导炎症模型和成骨诱导分化体系。

MIR4435-2HG在牙髓炎组织中上调
分析GSE92681数据集和临床样本均显示，MIR4435-2HG在炎症牙髓中显著升高，其区分健康与炎症组织的曲线下面积(AUC)达0.829，提示其作为诊断标志物的潜力。

MIR4435-2HG阻碍hDPSCs成骨分化
随着成骨诱导时间延长，MIR4435-2HG表达逐渐降低。当过表达该基因时，碱性磷酸酶(ALP)活性和成骨标志物(DMP-1/DSPP)的mRNA及蛋白水平均显著下降，证实其对hDPSCs成骨分化具有抑制作用。

沉默MIR4435-2HG抑制炎症并改善细胞表型
LPS刺激会剂量依赖性上调MIR4435-2HG。当研究人员用siRNA敲低该基因后，炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平明显降低，同时细胞增殖能力增强而凋亡减少。

MIR4435-2HG通过miR-296-5p调控炎症
生物信息学预测和实验验证发现，MIR4435-2HG能像"分子海绵"一样吸附miR-296-5p。两者在牙髓炎组织中呈显著负相关。当抑制miR-296-5p时，MIR4435-2HG敲低带来的抗炎效应和细胞保护作用都被逆转。

这项研究首次系统阐明了MIR4435-2HG在牙髓炎中的双重调控机制：一方面通过抑制成骨分化阻碍牙本质再生，另一方面通过miR-296-5p加剧炎症反应。值得注意的是，牙髓炎的炎症程度直接影响治疗效果，而该研究揭示的MIR4435-2HG/miR-296-5p轴为此提供了潜在干预靶点。虽然研究存在样本量有限等局限，但其创新性地将lncRNA调控网络与牙髓再生联系起来，为开发基于基因调控的牙髓炎治疗策略奠定了重要基础。未来研究可进一步探索该分子在动物模型中的治疗效果，以及其作为诊断标志物的临床应用价值。