基于网络药理学、分子对接、分子动力学及体内实验探究咳克片通过TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路抑制甲型流感病毒感染后感染后咳嗽的机制

本研究针对甲型流感病毒（IAV）感染后感染后咳嗽（PIC）治疗难题，通过UPLC-MS分析咳克片（KKT）活性成分，结合网络药理学、分子对接及动物实验，首次揭示KKT通过调控TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路抑制炎症小体组装及细胞焦亡（pyroptosis）的分子机制，为中医药治疗PIC提供科学依据。

　　

研究背景
甲型流感病毒（IAV）感染后咳嗽（PIC）是一种持续3-8周的亚急性咳嗽，占慢性咳嗽患者的11-25%。其发病机制涉及呼吸道炎症、咳嗽反射超敏反应及神经肽释放，临床常用抗组胺药、减充血剂等西药治疗，但易引发食欲减退、便秘等副作用。传统中药咳克片（KKT）源自经典方剂麻杏石甘汤，具有止咳化痰功效，但其治疗PIC的分子机制尚未明确。

研究方法
广州分析测试中心的研究团队采用超高效液相色谱-质谱联用技术（UPLC-MS）分析KKT化学成分，结合TCMSP和GeneCards数据库筛选药物与疾病靶点，通过PPI网络、GO/KEGG富集分析预测核心通路。利用分子对接和分子动力学模拟验证KKT活性成分与靶点结合能力，并建立豚鼠PIC模型（H1N1/PR8株感染）验证药效。

研究结果

1. KKT成分分析：UPLC-MS鉴定出29种高丰度成分，包括麻黄碱、苦杏仁苷等。
2. 网络药理学预测：筛选出10个核心靶点（如TLR4、NF-κB），富集分析显示KKT可能通过NOD样受体和Toll样受体通路调控炎症。
3. 分子模拟验证：分子对接显示KKT成分与TLR4/NF-κB/NLRP3蛋白结合稳定，分子动力学证实复合物构象稳定。
4. 动物实验验证：KKT显著降低感染豚鼠咳嗽频率，抑制肺组织TLR4/NF-κB/NLRP3通路活化及细胞焦亡相关因子释放。

结论与意义
该研究首次阐明KKT通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路，阻断炎症小体组装及神经肽（如P物质、缓激肽）释放，从而缓解PIC。发表于《International Immunopharmacology》的成果为中医药多靶点治疗病毒感染后咳嗽提供了分子层面的证据，推动临床精准用药。