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无血清培养基培养马脂肪来源间充质干/基质细胞的特性研究及其在生物兽药中的应用潜力
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年06月27日 来源:Cell and Tissue Biology
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来自STEMCELL Technologies(美国)的研究团队针对马脂肪来源间充质干/基质细胞(MSC(AT))临床化生产需求,开展无血清培养基(SFM)适配性研究。通过对比DMEM+10%胎牛血清(FBS)与商用MesenCult SFM培养10代的效果,证实该SFM能维持细胞形态、生长速率(倍增时间、有丝分裂指数)、克隆形成能力、二倍体核型及CD90+(90.8%)表型,同时保持成脂/成骨/成软骨分化潜能,为兽用细胞治疗产品开发提供标准化培养方案。
马脂肪组织来源的间充质干/基质细胞(equine adipose tissue-derived mesenchymal stem/stromal cells, MSC(AT))作为生物兽药的核心原料,其临床应用亟需优化无血清培养体系。有趣的是,尽管物种差异通常要求定制化培养基,但研究发现:专为人源MSC设计的商用无血清培养基MesenCult?(STEMCELL Technologies)竟能完美适配马源细胞!
实验设计充满巧思——将细胞分组培养于经典DMEM(低糖1 g/L+10%胎牛血清FBS)与MesenCult SFM中连续传代10次。令人振奋的是,SFM组细胞不仅保持典型纺锤形态,各项指标更是与FBS组旗鼓相当:生长曲线斜率几乎重叠、群体倍增时间稳定、有丝分裂指数达标,甚至能形成标志性的集落单位(CFU)。流式细胞术揭示高达90.8%的细胞表达干细胞标志物CD90,而内皮标志物CD31(0.8%)和造血标志物CD34(0.9%)几乎消失。更精彩的是,这些细胞在定向诱导培养基中纷纷变身——油红O染色的脂滴、茜素红染色的钙结节、阿尔新蓝染色的蛋白聚糖,三系分化潜能一个不少!
染色体核型分析显示所有细胞均为正常二倍体,彻底打消长期培养致基因组不稳定的顾虑。这项研究首次证明跨物种适用性SFM的可行性,为马源MSC(AT)的规模化生产铺平道路,那些困扰业界的批次差异和病毒污染风险,或许将随着无血清时代的到来成为历史。
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