维度增强型液相色谱/质谱联用技术解析二至丸与加味二至丸化学成分差异

本研究针对传统中药复方二至丸(EZF)与加味二至丸(JWEZF)的化学成分差异解析难题，开发了在线全二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱(2D-LC/QTOF-MS)和定时多反应监测(sMRM)技术。研究首次系统鉴定了JWEZF中289种和EZF中225种化合物，发现SC和ABR引入的52种新成分及12种新生化合物，定量分析证实了6种JWEZF特有成分及11种共有成分的含量差异。该研究为中药复方改良提供了科学依据。

　　

在传统中医药宝库中，二至丸(EZF)作为收录于《中国药典》的经典方剂，由酒女贞子(W-LLF)和墨旱莲(EH)等比例组成，具有滋补肝肾、强筋健骨等功效。随着临床实践发展，通过添加鸡血藤(SC)和牛膝(ABR)形成的加味二至丸(JWEZF)展现出更优的活血化瘀效果。然而，两种复方间的化学成分差异始终如"黑箱"般未被揭示，这直接制约了药效机制阐释和临床精准应用。

为解决这一难题，天津中医药大学的研究团队在《Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis》发表创新成果。研究采用维度增强分析策略，通过建立在线全二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱(2D-LC/QTOF-MS)系统，结合定时多反应监测(sMRM)定量技术，实现了对两种复方化学成分的系统解析。关键技术包括：优化30种反相色谱柱构建正交分离系统，开发4D数据可视化方法，以及建立包含26种分析物的sMRM定量方法。

【多维色谱系统建立】
通过系统筛选色谱柱和流动相，最终确定¹D采用Poroshell 120 EC-C₁₈柱，²D采用HSS T3柱的双反相系统，正交性达0.74。创新性地运用2D色谱轮廓图和4D数据图直观展示复方差异，有效峰容量达1,113。

【成分鉴定与差异分析】
在JWEZF中鉴定出289个化合物（含52个SC/ABR来源新成分），EZF中鉴定225个。特别发现酒女贞子与SC/ABR共煎导致11种共有成分含量变化，如特女贞苷含量显著提升。

【定量验证研究】
sMRM方法验证了JWEZF特有的6种成分（儿茶素、表儿茶素、竹节参皂苷IVa等），并量化了11种差异成分。其中β-蜕皮甾酮(β-ecdysterone)作为ABR标志物被准确定量。

该研究首次从化学维度揭示了加味策略的科学性：SC/ABR的引入不仅带来新活性成分，还通过煎煮相互作用改变原有成分谱。所建立的维度增强分析策略为中药复方研究提供了新范式，其4D可视化方法和正交分离系统尤其适用于复杂体系分析。这些发现不仅解释了JWEZF增强活血功效的物质基础，也为中药复方精准改良和质量控制提供了技术支撑，推动中医药现代化进程。