非洲多国验证：免提取唾液样本的比色RT-LAMP技术实现高效SARS-CoV-2检测

为解决资源有限地区SARS-CoV-2检测难题，国际团队在非洲11国开展多中心诊断准确性研究，验证比色RT-LAMP技术对鼻咽拭子提取RNA（灵敏度89%/特异性95%）和免提取唾液样本（80%/99%）的检测效能。该研究为疫情监测提供了经济、快速的分子诊断方案，成果发表于《The Lancet Global Health》。

　　

背景与挑战
新冠疫情暴发初期，资源有限地区面临分子诊断工具匮乏的困境。传统实时定量逆转录PCR（RT-qPCR）依赖昂贵设备、稳定电力和专业操作，而快速抗原检测灵敏度不足。更棘手的是，鼻咽拭子采样需要专业人员且引发不适，RNA提取步骤进一步增加检测成本。如何开发一种兼具高准确性、操作简便且成本低廉的检测方法，成为非洲等地区疫情防控的关键突破口。

国际遗传工程和生物技术中心（ICGEB）联合非洲11国研究团队，在《The Lancet Global Health》发表重要成果。研究首次系统评估了比色逆转录环介导等温扩增（RT-LAMP）技术在非洲多国不同医疗场景下的应用潜力，创新性地将免RNA提取的唾液样本纳入检测体系，为资源匮乏地区提供了可扩展的解决方案。

关键技术方法
研究采用多阶段设计：1）在斯洛文尼亚和意大利进行预实验，通过WHO标准品确定检测限；2）非洲7国2774例鼻咽拭子样本评估RT-LAMP对提取RNA的检测性能；3）非洲4国577例配对唾液样本验证免提取方案的可行性。所有结果均以各参与实验室的RT-qPCR为金标准，采用标准化试剂和操作流程，通过2×2列联表计算诊断参数。

研究结果

预实验验证检测效能
通过338例配对样本发现，鼻咽拭子病毒载量显著高于唾液（Ct值差异3.9，p<0.0001）。RT-LAMP对唾液的临床检测限为58拷贝/μL，对高病毒载量样本（>100拷贝/μL）灵敏度达100%。

多国鼻咽拭子检测数据
在2774例样本中，RT-LAMP展现出89%的敏感性和95%的特异性。值得注意的是，在Ct值<25的高病毒载量样本中，灵敏度提升至94%，而Ct≥25时降至70%，证实其更适合传染期患者筛查。

唾液样本突破性应用
免提取唾液方案实现80%敏感性和99%特异性。尽管灵敏度随病毒载量降低而下降（Ct≥25时为70%），但其操作简便性优势显著：仅需15μL唾液与裂解缓冲液混合，30分钟即可通过颜色变化判读结果。

讨论与意义
该研究首次在真实世界条件下证明，比色RT-LAMP可作为非洲地区SARS-CoV-2诊断的可靠替代方案。其核心价值体现在：1）成本效益比传统RT-qPCR降低60%；2）唾液采样避免专业耗材需求，支持自采样；3）63°C恒温扩增摆脱精密仪器依赖。

研究同时揭示了技术优化方向：唾液pH变异导致5.4%结果判读困难，建议配套开发标准化比色卡。值得关注的是，在非洲疾病预防控制中心报告的18.9%高流行率场景下，唾液检测的阳性预测值达95%，显著优于鼻咽拭子方案（81%），这使其特别适合社区爆发期快速筛查。

研究团队正与非洲监管部门合作推动该方法获批。更深远的意义在于，该技术框架可扩展至疟疾、结核等传染病检测，为构建非洲本土化病原体监测网络提供了技术范本。正如通讯作者A. Marcello强调："这项跨国合作证明，因地制宜的技术创新比简单移植发达国家方案更能有效应对全球卫生挑战。"