基于全自动在线SPE-LC-FL系统的绿色生物分析：乳腺癌患者血浆中多柔比星及其代谢物的药代动力学研究

为解决乳腺癌治疗中多柔比星(DOX)及其代谢物多柔比星醇(DOXol)的精准监测难题，研究人员开发了一种全自动在线固相萃取-液相色谱-荧光检测(SPE-LC-FL)方法。该方法无需样本预处理，实现了DOX和DOXol在25.00–1500.00 ng/mL范围内的同步检测，回收率≥76.94%，相对标准偏差≤5%。通过3例患者药代动力学研究验证，静脉注射后DOX和DOXol的Cmax分别为978.58–1109.63 ng/mL和30.26–118.11 ng/mL。该研究为临床个体化给药提供了高效、环保的分析工具，AGREE绿色评分为0.74/1.0。

　　

乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，而多柔比星(DOX)作为源自链霉菌的蒽环类抗生素，是治疗乳腺癌的核心药物。然而，DOX的临床应用面临两大挑战：一是其治疗窗狭窄，过量使用会导致剂量依赖性心脏毒性；二是其活性代谢物多柔比星醇(DOXol)会进一步加剧心肌损伤。传统检测方法需要繁琐的样本预处理，且难以实现DOX与DOXol的同步分析。更棘手的是，现有技术往往使用大量有机溶剂，不符合绿色化学原则。

为解决这些问题，伊斯坦布尔大学的研究团队开发了一种全自动在线SPE-LC-FL系统，可直接分析患者血浆样本，相关成果发表在《Microchemical Journal》。这项研究首次将绿色分析理念引入DOX监测领域，通过自动化技术实现了样本预处理、分离检测的一体化，不仅提高了分析效率，还显著减少了化学废物排放。

关键技术包括：1）采用自填充C4烷基二醇硅胶限制性进入材料(ADS C4)的SPE柱进行在线净化；2）Zorbax Rx-C18色谱柱(4.6×150.0 mm, 3.5 μm)梯度洗脱分离；3）荧光检测器(λ_ex 478 nm/λ_em 510 nm)定量；4）应用AGREE工具评估方法绿色度；5）采集3例乳腺癌患者24小时内的血浆样本进行药代动力学验证。

结果与讨论

1. 方法验证：线性范围25.00–1500.00 ng/mL，DOX和DOXol的相关系数分别达0.9982和0.992。定量限(QL)均为15.00 ng/mL，检出限(DL)低至5.00 ng/mL。
2. 绿色性能：AGREE评分0.74，符合替换、减少、再利用、再循环四大可持续原则。相比传统方法节省90%有机溶剂。
3. 临床应用：患者静脉注射后，DOX的C_max(978.58–1109.63 ng/mL)显著高于DOXol(30.26–118.11 ng/mL)，证实代谢转化率个体差异显著。

结论
该研究建立了首个符合绿色化学原则的DOX/DOXol同步监测平台，其创新性体现在：1）首次实现血浆样本的直接进样分析；2）通过正交分离机制(C4 SPE柱与C18分析柱联用)增强选择性；3）系统整合自动化与微型化技术。临床验证显示该方法能精准捕捉患者间的药代动力学差异，为个体化化疗提供了可靠工具。尤其值得注意的是，76.94%的DOXol回收率克服了既往方法中极性代谢物损失的技术瓶颈，而≤5%的RSD保证了临床监测的重复性。这些突破使得实时调整给药方案成为可能，有望显著降低蒽环类药物心脏毒性风险。