基于改进QuEChERS-UPLC-MS/MS技术的医用水蛭中109种药物残留快速筛查方法研究

本研究针对医用水蛭养殖过程中农药和兽药残留风险，开发了一种改进的QuEChERS前处理结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术，实现了109种多类别残留物的同步检测。该方法线性良好(R2>0.99)，灵敏度高(LOD 0.07-1.0 μg/kg)，回收率70.1%-119%，为中药材安全监管提供了高效解决方案。

　　

医用水蛭作为传统中药材已有两千余年应用历史，其抗血栓、抗凝等药理作用在现代医学中得到验证。然而随着野生资源枯竭，人工养殖过程中暴露出的药物残留问题日益突出：饲料来源的农药兽药、养殖环境污染物以及不当用药行为，导致水蛭体内可能蓄积多种有害残留。更严峻的是，此前仅有一篇文献报道过水蛭中有限农药的检测，对109种多类别残留物的同步筛查尚属空白。

针对这一技术瓶颈，国内研究人员创新性地将改进的QuEChERS（快速、简便、廉价、高效、耐用、安全）前处理与超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)联用。通过优化提取溶剂（乙腈含1%甲酸）和净化材料组合（50 mg PSA+50 mg C₁₈+150 mg MgSO₄），建立了动态多反应监测(d-MRM)分析方法。研究采用外标法定量，系统评估了方法学参数。

主要技术方法
样本经改良QuEChERS提取净化后，采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱分离，电喷雾电离(ESI)正负离子切换模式下采集数据。通过优化碰撞能量(CE)和锥孔电压等质谱参数，选定每个化合物两对特征离子对（定量离子对和定性离子对），最终建立包含109种化合物的数据库。

研究结果

方法学验证
所有化合物在1-200 μg/L范围内线性良好（R²≥0.9901），定量限(LOQ)为2.1-5.3 μg/kg。在三个加标水平下，回收率70.1%-119%，相对标准偏差(RSD)<20%。基质效应实验表明，82.6%化合物表现为弱抑制（|ME|<20%），证明净化效果显著。

实际样本检测
在30批市售水蛭中检出恩诺沙星等4种兽药残留，最高残留量18.3 μg/kg，远低于欧盟限量标准（100 μg/kg），但提示仍需持续监测。

结论与意义
该研究首次实现水蛭中109种多类别残留的同步检测，相比传统方法前处理时间缩短60%，溶剂用量减少80%。建立的数据库可拓展应用于其他动物药材检测，为《中国药典》残留限量标准制定提供技术支撑。特别是动态多反应监测(d-MRM)技术的应用，显著提高了复杂基质中痕量物质的检测可靠性。研究成果发表于《Microchemical Journal》，对保障中药材安全及推动传统药物国际化具有重要实践价值。