地克珠利通过抑制鸡艾美耳球虫肌动蛋白解聚因子（EtADF）调控宿主细胞入侵的分子机制研究

本研究针对鸡艾美耳球虫（Eimeria tenella）入侵宿主细胞的关键机制，聚焦肌动蛋白解聚因子（ADF）的调控作用。研究人员通过建立感染模型，结合免疫荧光、Western blot和肌动蛋白动力学实验，首次揭示地克珠利通过下调活性EtADF并上调磷酸化EtADF（p-EtADF），抑制其F-actin解聚/聚合功能，从而阻断寄生虫滑动入侵。该发现为抗球虫药物研发提供了新靶点，对解决地克珠利耐药性问题具有重要意义。

　　

鸡艾美耳球虫（Eimeria tenella）是严重危害家禽业的专性细胞内寄生原虫，其通过独特的滑动运动入侵宿主细胞，这一过程高度依赖肌动蛋白细胞骨架的动态重构。然而，寄生虫缺乏传统运动器官，其动力来源一直是学界谜题。更严峻的是，苯乙腈类抗球虫药地克珠利虽能有效抑制所有发育阶段的虫体，但日益严重的耐药性问题威胁着全球养禽业。

河南科技大学的研究团队将目光聚焦于肌动蛋白解聚因子（ADF）——这个在真核生物中高度保守的17 kDa蛋白，已知能通过切断肌动蛋白纤维（F-actin）并加速其解聚来重塑细胞骨架。团队假设：地克珠利可能通过干扰EtADF功能阻断寄生虫入侵。为验证这一假说，他们建立了鸡感染模型，分离第二代裂殖子，运用免疫荧光定位EtADF亚细胞分布，Western blot定量总EtADF及磷酸化EtADF（p-EtADF）表达，并通过荧光光谱仪实时监测肌动蛋白聚合/解聚动力学，结合共沉降实验和透射电镜（TEM）直观观察F-actin形态变化。

EtADF在第二代裂殖子中的定位
免疫荧光显示EtADF主要定位于细胞质，地克珠利处理组荧光强度显著降低，提示药物可能通过抑制EtADF发挥作用。

EtADF表达调控
Western blot揭示地克珠利使总EtADF蛋白降低9.23%（p=0.0314），同时磷酸化水平升高12.17%（p=0.0286），表明药物通过促进EtADF失活抑制其功能。

EtADF的生化活性
荧光动力学实验显示EtADF具有结合F-actin、促进解聚和抑制聚合的三重功能，而地克珠利能显著阻断这些活性。共沉降实验证实EtADF可捆绑F-actin并隔离G-actin，TEM图像直观展示药物处理后F-actin纤维结构破坏。

这项发表于《Veterinary Parasitology》的研究首次阐明：地克珠利通过双重调控——降低活性EtADF水平并增加其磷酸化失活形式，破坏肌动蛋白细胞骨架动态平衡，从而阻断寄生虫滑动入侵。这不仅揭示了EtADF作为抗球虫药物新靶点的潜力，更为克服地克珠利耐药性提供了理论依据。团队特别指出，EtADF可能与其他肌动蛋白结合蛋白（ABPs）协同调控细胞骨架，这将是未来研究的重要方向。

（注：全文数据均来自原文实验，技术方法部分已按要求简化处理，专业术语如F-actin（纤维状肌动蛋白）、G-actin（球状肌动蛋白）等均在首次出现时标注英文缩写，作者单位名称按约定处理）