综述：外泌体多重生物标志物同步检测的最新进展

（编辑推荐）本综述系统梳理了外泌体（exosomes）作为肿瘤液体活检标志物的检测技术进展，重点对比了传统方法（WB/ELISA/RT-PCR）与新兴同步检测技术（如多重蛋白分析、miRNA联检、蛋白-miRNA整合分析）在灵敏度、通量及临床转化潜力上的差异，为精准医学领域研究者提供了跨学科技术路线图。

　　

外泌体：肿瘤诊断的纳米信使

Abstract
外泌体是细胞分泌的纳米级囊泡（30-150 nm），广泛存在于体液中。其表面蛋白、内部核酸与肿瘤发生发展密切相关，为癌症筛查和精准医疗提供新思路。传统检测方法（如Western blot、ELISA）存在操作复杂、灵敏度低等局限，而新兴同步检测技术凭借高灵敏度、高通量等优势成为研究热点。

Introduction
外泌体作为细胞间通讯载体，携带蛋白质、miRNA等生物分子，能可靠反映机体病理状态。肿瘤患者体液中外泌体浓度显著升高，且与肿瘤大小、转移相关。例如，Kim团队发现小细胞肺癌（SCLC）中三种外泌体miRNA（miR-200b-3p、miR-3124-5p和miR-92b-5p）联合检测可将诊断AUC提升至0.93，凸显多标志物分析的价值。

Exosome isolation methods
外泌体分离技术包括超速离心（金标准）、密度梯度离心、微流控芯片等。超速离心虽纯度高但耗时，而基于纳米材料的微流控技术可实现快速、高纯度分离，更适合临床转化。

Simultaneous detection of multiplexed biomarkers
多重蛋白分析：量子点编码技术可同步检测外泌体CD63/EGFR/HER2等蛋白标志物，灵敏度达fg/mL级。
miRNA联检：CRISPR-Cas12a耦合微流控平台实现10种miRNA并行分析，检测限低至10^-18 mol/L。
蛋白-miRNA整合分析：如"适体-纳米孔"技术可同步捕获外泌体PD-L1蛋白与let-7a miRNA，揭示肿瘤免疫逃逸机制。

Comparative analysis
纳米材料传感器（如石墨烯场效应管）展现显著优势：信号放大效应强、检测范围宽（10³-10¹² particles/mL），但标准化仍是临床应用的瓶颈。

Single-cell or single exosome analysis
微流控单外泌体分析技术可解析异质性，例如通过表面等离子体共振（SPR）实时监测单个外泌体分泌过程，为肿瘤异质性研究提供新工具。

未来展望
跨学科融合（如AI辅助数据分析）、标准化样本库建设及低成本POCT设备开发将是推动外泌体检测技术临床落地的关键。