新辅助PD-1阻断通过诱导免疫细胞自噬促进复发性胶质母细胞瘤协同治疗

针对PD-1阻断治疗胶质母细胞瘤(GBM)耐药及肿瘤复发的难题，研究人员通过单细胞测序揭示了新辅助PD-1阻断诱导L+M细胞自噬的关键作用，发现HLA-DRA-CD4和GZMA-F2R互作通路，并筛选出靶向CXCL8/IL6的利巴韦林可增强疗效，为GBM免疫治疗提供新策略。

　　

胶质母细胞瘤(GBM)是最具侵袭性的脑肿瘤，尽管免疫检查点抑制剂如PD-1(程序性死亡受体1)阻断在多种癌症中取得突破，但其对GBM患者的生存改善仍有限。研究表明，新辅助PD-1阻断可能通过重塑肿瘤免疫微环境(TIME)增强抗肿瘤免疫，但自噬(autophagy)的激活可能同时导致治疗抵抗。这一矛盾现象背后的细胞机制尚不明确，特别是哪些免疫细胞亚群的自噬被PD-1阻断调控，以及如何靶向这些过程，成为亟待解决的科学问题。

浙江省人民医院等机构的研究人员通过分析来自GEO数据库的12例复发性GBM(GBM.rec)和14例新辅助PD-1阻断治疗GBM(GBM.PD1)组织的单细胞测序数据，首次揭示了兼具淋系和髓系特征的L+M细胞(lymphoid+myeloid cells)在PD-1阻断诱导的自噬中的核心作用。研究发现，PD-1阻断显著增加了具有高自噬水平的淋系细胞比例，其中高表达载脂蛋白E(APOE)的L+M细胞表现出最强的自噬关联性。这些细胞通过HLA-DRA-CD4互作参与免疫调控，并在PD-1治疗后显示出更多T细胞相关互作(如GZMA-F2R)。通过药物筛选，团队意外发现抗病毒药物利巴韦林(ribavirin)可通过靶向CXCL8和IL6调控L+M细胞，为增强PD-1疗效提供了新方案。该研究发表于《Biochemistry and Biophysics Reports》。

关键技术方法包括：1)基于GSE154795数据集的单细胞转录组分析(Seurat软件)；2)自噬评分系统(232个自噬相关基因的ssGSEA算法)；3)细胞互作网络构建(CellChat分析)；4)APOE⁺细胞验证(3对原发/复发GBM组织的多重免疫组化)。

研究结果：

1. 新辅助PD-1阻断增强GBM微环境细胞异质性
   单细胞分析鉴定出8种细胞类型，PD-1治疗组淋系细胞和髓系-树突细胞浸润增加。自噬评分显示PD-1组淋系细胞自噬水平显著升高，而小胶质细胞自噬降低。

2. 高自噬水平与特定配体-受体互作相关
   高自噬组富集45条通路(低自噬组仅7条)，其中HLA-DRA-CD4是贡献度最高的互作对，提示CD4⁺T细胞调控自噬的关键作用。

3. L+M细胞是PD-1诱导自噬的关键免疫组分
   APOE⁺ L+M细胞在PD-1组比例增加，其标志基因与自噬相关基因(如SQSTM1、LAMP2)显著相关。复发GBM组织中APOE表达升高而SQSTM1降低，证实自噬增强。

4. 利巴韦林靶向L+M细胞的治疗潜力
   基于GSE4290数据筛选出CXCL8和IL6作为关键靶点，药物网络分析显示利巴韦林可同时调控这两个分子，可能通过抑制L+M细胞自噬增强PD-1疗效。

结论与意义：该研究首次阐明L+M细胞作为PD-1阻断诱导自噬的核心效应细胞，其通过HLA-DRA-CD4和GZMA-F2R等互作调控免疫应答。临床常用药物利巴韦林的发现为克服GBM免疫治疗耐药提供了即时可用的联合策略。未来需进一步验证L+M细胞在肿瘤免疫逃逸中的功能，并探索利巴韦林与PD-1阻断的协同机制。