circ_0084927通过吸附miR-4725-5p激活PDPK1/AKT/mTOR通路促进肝内胆管癌进展及吉西他滨耐药性传递

本研究针对肝内胆管癌(ICC)进展机制不明和化疗耐药难题，通过RNA测序发现circ_0084927显著上调，证实其通过竞争性结合miR-4725-5p激活PDPK1/AKT/mTOR通路促进ICC恶性表型，并首次揭示外泌体介导的circ_0084927耐药性传递机制，为ICC预后评估和靶向治疗提供新思路。

　　

肝内胆管癌(ICC)作为第二常见的原发性肝癌，近40年全球发病率激增140%，但患者五年生存率仍不足30%。由于缺乏典型早期症状，70%患者确诊时已属晚期，而吉西他滨化疗耐药性更成为临床治疗的主要瓶颈。circRNA作为新型调控分子，虽在多种肿瘤中发挥作用，但其在ICC中的具体机制尚未阐明。河南省人民医院的研究团队通过高通量测序和功能验证，揭示了circ_0084927在ICC中的关键作用及其耐药性传递的创新机制。

研究采用RNA测序筛选5对ICC组织差异表达circRNA，通过qRT-PCR验证70例临床样本表达水平，结合预后分析建立circ_0084927的临床相关性。体外构建敲低/过表达细胞模型，采用CCK-8、Transwell等实验评估功能影响。通过生物信息学预测和双荧光素酶报告基因验证miR-4725-5p靶向关系，Western blot检测PDPK1/AKT/mTOR通路蛋白。外泌体分离实验解析耐药性传递机制。

Circ_0084927显著上调并与不良预后相关
RNA测序发现246个差异表达circRNA，其中circ_0084927在ICC组织中表达量升高6.8倍（Log₂FC≥2）。临床数据分析显示，高表达组患者中位生存期缩短42%，肿瘤直径和淋巴结转移率显著增加。

促进恶性生物学行为
体外实验表明，circ_0084927过表达使ICC细胞增殖率提高2.3倍，侵袭细胞数增加180%，而凋亡率下降60%。裸鼠移植瘤模型显示，敲低组肿瘤体积减少55%，重量下降48%。

miR-4725-5p/PDPK1轴调控机制
生物信息学预测结合实验验证显示，circ_0084927含有7个miR-4725-5p结合位点。双荧光素酶报告基因证实两者直接结合（荧光素酶活性降低72%），rescure实验表明miR-4725-5p可逆转circ_0084927促癌效应。Western blot显示circ_0084927上调PDPK1表达2.1倍，激活AKT(Ser⁴⁷³)和mTOR磷酸化。

外泌体介导耐药性传递
从吉西他滨耐药细胞分离的外泌体富含circ_0084927（浓度提高3.5倍）。将耐药细胞外泌体与敏感细胞共培养后，IC₅₀值上升4.2倍，凋亡率下降65%，且该效应可被circ_0084927抑制剂逆转。

该研究首次阐明circ_0084927通过"海绵吸附"机制调控miR-4725-5p/PDPK1/AKT/mTOR轴促进ICC进展，并创新性发现外泌体介导的耐药性横向传递现象。这不仅为ICC提供了新的预后标志物（AUC=0.87），更揭示了同时靶向circRNA和外泌体的联合治疗策略。研究涉及的Key R&D项目资助和临床样本队列增强了结论的可靠性，为克服ICC治疗困境提供了理论依据和转化医学价值。