靶向YB-1的新型京尼平衍生物增强P-糖蛋白介导的紫杉醇耐药非小细胞肺癌敏感性研究

为解决紫杉醇耐药性限制非小细胞肺癌（NSCLC）疗效的难题，研究人员通过合成23种京尼平衍生物，发现化合物13能靶向YB-1蛋白，抑制P-gp（P-glycoprotein）功能，显著增强A549/Taxol细胞对紫杉醇的敏感性，并在动物模型中验证其低毒性和协同抗肿瘤效果，为克服多药耐药（MDR）提供了新型化疗增敏剂策略。

　　

肺癌是全球癌症死亡的首要原因，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占比高达85%。紫杉醇作为一线化疗药物，其疗效常因多药耐药（MDR）而受限，主要机制涉及P-糖蛋白（P-gp）过度表达导致的药物外排。Y盒结合蛋白1（YB-1）作为转录因子，通过激活MDR1基因促进P-gp表达，成为逆转耐药的新靶点。传统中药成分京尼平苷虽具P-gp抑制活性，但逆转效果有限。

为突破这一瓶颈，贵州医科大学等机构的研究团队设计合成了23种京尼平衍生物，通过Knoevenagel缩合和酰化反应构建甲基吲哚酮中间体，最终获得目标化合物。研究采用A549/Taxol紫杉醇耐药细胞模型，结合体内异种移植实验，发现化合物13能显著降低YB-1蛋白总量及核内水平，进而抑制P-gp表达与功能，使细胞内紫杉醇浓度提升3.2倍。关键实验技术包括：1）基于核磁共振（¹H NMR/¹³C NMR）和质谱（HRMS-ESI）的化合物结构鉴定；2）免疫组化（IHC）分析肿瘤组织YB-1/P-gp表达；3）高效液相色谱（HPLC）检测药物蓄积量；4）小鼠移植瘤模型评估体内药效。

合成与结构鉴定
通过模块化合成策略获得23种衍生物，化合物13（C₃₁H₂₈N₂O₆）经波谱学确认为核心活性分子。

体外活性验证
在2 μM浓度下，化合物13使紫杉醇IC₅₀值降低8.7倍，逆转指数达12.4，且对正常细胞毒性低于Geniposide（CC₅₀ >50 μM）。Western blot显示其使P-gp表达量减少62%。

机制研究
化合物13通过阻断YB-1核转位（核内YB-1降低54%），抑制MDR1启动子活性，荧光素酶报告基因实验证实其对YB-1/P-gp通路的特异性调控。

体内药效评估
联合用药组小鼠肿瘤体积缩小68%（p<0.01），H&E染色证实心肝肾无病理损伤，IHC显示肿瘤组织P-gp表达下调71%。

该研究首次揭示京尼平衍生物靶向YB-1/P-gp轴逆转紫杉醇耐药的作用机制。化合物13作为新型化疗增敏剂，具有临床转化潜力：1）突破传统P-gp抑制剂毒性大的局限；2）为YB-1核转运调控提供化学探针；3）为NSCLC联合化疗提供新策略。论文发表于《European Journal of Medicinal Chemistry》，为克服肿瘤MDR开辟了药物设计新路径。