草鱼Mex3C通过促进RIG-I的K63泛素化激活先天免疫机制

本研究揭示了草鱼（Ctenopharyngodon idellus）Mex3C基因（CiMex3C）在抗病毒先天免疫中的关键作用。研究人员发现CiMex3C通过其RING结构域发挥E3泛素连接酶活性，直接催化RIG-I的K63泛素化，从而激活RIG-I-IRF3-IFN I信号轴，增强宿主对草鱼呼肠孤病毒（GCRV）等病原体的防御能力。该研究为鱼类免疫调控机制提供了新见解，并为水产养殖抗病育种提供了潜在靶点。

　　

研究背景与意义
在水产养殖业中，草鱼呼肠孤病毒（GCRV）每年造成巨大经济损失，而鱼类主要依赖先天免疫系统对抗病毒感染。作为核心模式识别受体（PRR），RIG-I样受体（RLR）通过识别病毒RNA触发干扰素（IFN I）产生，但其调控机制在低等脊椎动物中尚不明确。哺乳动物研究表明，RIG-I的K63泛素化对其激活至关重要，但鱼类中相关调控网络仍属空白。

研究机构与发表信息
国内研究团队在《Fish》发表论文，首次阐明草鱼Mex3C（CiMex3C）通过泛素化修饰调控RIG-I活性的分子机制。该研究不仅填补了鱼类先天免疫调控的理论空白，还为抗病育种提供了新思路。

关键技术方法

1. 基因克隆与序列分析：从草鱼肾脏细胞（CIK）克隆CiMex3C全长cDNA
2. 系统发育与结构预测：采用AlphaFold3预测蛋白结构域
3. 功能验证：通过过表达/敲低实验结合免疫共沉淀（Co-IP）和泛素化检测
4. 免疫荧光共定位：观察CiMex3C与RIG-I的亚细胞分布

研究结果

CiMex3C表达特征
CiMex3C编码含RING结构域和两个KH结构域的蛋白，对GCRV、poly(I:C)等多种刺激敏感。系统发育分析显示其在脊椎动物中高度保守，结构预测揭示其具有典型E3泛素连接酶特征。

功能机制解析

• 泛素化调控：过表达CiMex3C显著增强RIG-I的K63泛素化，而siRNA敲低则抑制该过程
• 酶活验证：RING结构域突变体丧失促泛素化能力，证实其E3连接酶功能
• 信号通路激活：CiMex3C通过促进RIG-I-MAVS-IRF3级联反应，上调IFN I表达

讨论与结论
该研究首次揭示鱼类Mex3C通过"RNA结合-泛素化"双功能模块调控RLR信号的新范式：

1. 进化意义：不同于哺乳动物Mex3C的促癌作用，鱼类同源基因保留原始免疫调控功能，反映物种特异性适应
2. 应用价值：为水产抗病育种提供CiMex3C-RIG-I轴作为潜在靶点
3. 理论突破：完善了"E3泛素连接酶-RBP协同调控PRR"的免疫调控模型

研究团队特别致谢上海海洋大学邹钧教授提供的CIK细胞，以及中科院水生所张义兵研究员馈赠的GCRV873毒株。作者声明无利益冲突。