超声激活纳米囊泡通过腺苷耗竭与多免疫检查点阻断协同增强肿瘤免疫治疗

本研究针对肿瘤微环境(TME)中腺苷介导的免疫抑制及免疫检查点分子上调导致的免疫逃逸问题，开发了超声(US)激活的ADA/Ce6@tLipo纳米囊泡系统。该系统通过声动力效应诱导免疫原性细胞死亡(ICD)，利用腺苷脱氨酶(ADA)将腺苷转化为肌苷，同时通过T细胞膜携带的免疫检查点分子阻断配体，实现腺苷代谢重编程与多检查点协同抑制，显著增强T细胞抗肿瘤活性，为克服肿瘤免疫耐受提供了新策略。

　　

肿瘤免疫治疗面临的核心挑战之一，是肿瘤微环境(TME)中腺苷的免疫抑制屏障。当传统疗法诱导免疫原性细胞死亡(ICD)释放大量ATP时，这些ATP会被CD39/CD73酶迅速降解为腺苷，进而通过A_2AR受体信号通路抑制T细胞功能并上调PD-1等免疫检查点分子，形成“免疫逃逸双刃剑”。如何同时阻断腺苷信号和多重检查点，成为突破治疗瓶颈的关键。

河南科研团队在《Journal of Controlled Release》发表的研究中，创新性地构建了超声响应型纳米囊泡ADA/Ce6@tLipo。该系统通过T细胞膜包被的脂质体共载氯e6(Ce6)和腺苷脱氨酶(ADA)，利用超声触发声动力效应产生ROS诱导ICD，同时通过ADA将腺苷不可逆转化为促免疫的肌苷。更巧妙的是，纳米囊泡表面展示的检查点分子可竞争性结合肿瘤细胞配体，实现“代谢干预-检查点阻断”双重协同。

关键技术包括：1) 薄膜水化法制备Ce6/ADA共载脂质体；2) T细胞膜杂交技术赋予靶向性；3) 超声触发ROS生成与pH敏感型DSPE-PEOz脂质体酸响应释放；4) 流式细胞术验证T细胞活化；5) 小鼠模型评估抗肿瘤效果。

研究结果
合成与表征：透射电镜显示ADA/Ce6@tLipo为粒径约120 nm的球形结构，T细胞膜成功整合使Zeta电位从-15 mV升至-8 mV。体外实验证实超声触发Ce6产生单线态氧(¹O₂)，ROS水平较对照组提高3.2倍。

腺苷代谢调控：在模拟TME条件下，ADA在6小时内降解83%的腺苷，同时使CD8⁺T细胞IFN-γ分泌量增加2.7倍。质谱检测显示肌苷浓度与T细胞增殖呈正相关。

免疫检查点阻断：流式分析显示，纳米囊泡表面的PD-1、CTLA-4等分子可结合80%以上的肿瘤细胞PD-L1，使T细胞耗竭标志物TIM-3表达下降62%。

体内抗肿瘤效果：在4T1荷瘤小鼠中，US+ADA/Ce6@tLipo组肿瘤抑制率达78%，且脾脏中效应记忆T细胞比例较对照组提高4.3倍。免疫荧光显示治疗组肿瘤内CD8⁺T细胞浸润增加5.1倍。

结论与意义
该研究首创性地将腺苷代谢干预与多检查点阻断整合于单一纳米平台。通过超声精确控制药物释放，同步实现：1) 声动力诱导ICD启动免疫循环；2) ADA介导的腺苷-肌苷转化重塑免疫微环境；3) T细胞膜检查点分子“诱饵”式阻断。这种“三位一体”策略突破了现有免疫治疗单一路径的局限性，尤其对CD73^high/PD-L1^high型肿瘤具有显著优势。研究为联合代谢调控与免疫编辑提供了普适性技术框架，相关膜杂交技术可扩展至其他检查点抑制剂递送领域。