人参皂苷Rg5通过转录及翻译后调控细胞周期蛋白增强ER阳性乳腺癌对Abemaciclib的敏感性

本研究针对ER+乳腺癌对CDK4/6抑制剂Abemaciclib的耐药难题，揭示了人参皂苷Rg5通过双重机制（抑制PI3K/Akt通路转录下调CDK4/6、破坏HSP90-CDC37复合体促进CDK4/6蛋白降解）显著增强药物敏感性的创新策略，为克服临床耐药提供新思路。

　　

在乳腺癌治疗领域，雌激素受体阳性（ER+）亚型占据约70%的病例，CDK4/6抑制剂如Abemaciclib虽显著改善患者生存，但耐药性问题日益凸显。耐药机制复杂多样，包括PI3K/Akt/mTOR通路的代偿激活、细胞周期蛋白（Cyclin D/E）的异常表达等。传统解决方案如联合PI3K抑制剂常伴随严重毒性，而靶向HSP90-CDC37分子伴侣系统的策略又面临选择性不足的挑战。这一背景下，天然产物人参皂苷Rg5因其在肺癌、肝癌中展现的多靶点调控特性进入研究者视野——它既能抑制PI3K/Akt信号，又可特异性破坏HSP90-CDC37相互作用，但该双机制能否协同克服CDK4/6抑制剂耐药仍属未知。

四川省人民医院的研究团队通过构建Abemaciclib耐药细胞株（MCF-7/AR和T47D/AR），结合体外实验与小鼠模型，系统评估了Rg5的增敏效应。关键技术包括：CCK-8检测细胞活力、流式细胞术分析细胞周期、qRT-PCR和Western blot检测基因/蛋白表达、Co-IP验证蛋白互作、CHX追踪蛋白半衰期，以及裸鼠异种移植实验验证体内疗效。

Ginsenoside Rg5 treatment reduces Abemaciclib resistance
研究发现Rg5（40 μM）与Abemaciclib（1 μM）联用使耐药细胞IC₅₀降低5倍，协同诱导G₁期阻滞和凋亡（cleaved caspase-3/9上调）。耐药细胞中PI3K/Akt/mTOR通路过度激活，而Rg5处理使p-Akt（Ser⁴⁷³）和p-mTOR（Ser²⁴⁴⁸）水平降至亲本细胞水平。

Ginsenoside Rg5 suppresses transcriptional regulation
qRT-PCR显示Rg5显著下调CDK4、CDK6、CCND1（Cyclin D1）和CCNE1（Cyclin E1）的mRNA，Western blot证实其蛋白水平同步降低。有趣的是，蛋白酶体抑制剂MG132仅部分逆转CDK4/6降解，提示存在非转录调控机制。

Ginsenoside Rg5 disrupts HSP90-CDC37 interaction
Co-IP实验揭示Rg5特异性破坏HSP90-CDC37结合，CETSA证实其增强HSP90热稳定性。CHX追踪实验显示Rg5使CDK4/6半衰期从>16小时缩短至6小时，效果与HSP90抑制剂17-AAG相当。

HSP90A-Y61A mutant cancels Rg5 effects
引入对Rg5不敏感的HSP90α-Y61A突变体后，CDK4/6稳定性恢复，增敏效应消失。动物实验中，Rg5+Abemaciclib使shNC组肿瘤体积缩小60%，而shHSP90A+Y61A组无显著差异，IHC显示Ki-67、CDK4/6表达变化与体外结果一致。

这项研究首次阐明天然化合物Rg5通过"转录抑制（PI3K/Akt介导的基因下调）+翻译后调控（HSP90-CDC37破坏诱导蛋白降解）"双管齐下的机制克服CDK4/6抑制剂耐药。相较于传统HSP90抑制剂，Rg5选择性靶向CDC37互作界面，避免引发热休克反应，其与Abemaciclib的协同指数达2.3且未观察到肝肾毒性。临床转化方面，20 mg/kg剂量的Rg5在动物模型中达到有效血药浓度，为后续联合用药方案设计提供依据。未来需在患者来源类器官（PDO）模型中验证该策略的普适性，并探索Rg5与其他CDK4/6抑制剂的协同效应。论文发表于《Journal of Ginseng Research》，为天然产物逆转靶向药耐药提供了范式性研究。