γ-谷氨酰转肽酶(GGT)和谷胱甘肽(GSH)双响应纳米平台增强藤黄酸(GA)在三阴性乳腺癌中的穿透与疗效

为解决三阴性乳腺癌(TNBC)治疗中药物渗透性差和靶向性不足的问题，南京医科大学附属无锡妇幼保健院团队开发了基于PLGA-SS-PEG-Glu的双响应纳米平台。该平台通过GGT介导的电荷反转增强肿瘤穿透，GSH触发药物释放，体外实验显示IC50低至0.80 μg/ml，并激活Nrf2/HO-1-Bcl-2/caspase-3通路诱导凋亡。体内实验证实其显著抑制原发瘤生长和肺转移灶形成，为TNBC治疗提供了新策略。

　　

三阴性乳腺癌（TNBC）因其缺乏雌激素受体、孕激素受体和人表皮生长因子受体2（HER2）表达，成为乳腺癌中最具侵袭性的亚型，临床治疗选择有限且预后较差。传统化疗药物如藤黄酸（Gambogic acid, GA）虽具有广谱抗肿瘤活性，但面临溶解度低、稳定性差和肿瘤靶向性不足等挑战。更棘手的是，TNBC致密的细胞外基质和异质性微环境严重阻碍药物渗透，导致疗效受限。如何突破这些屏障，实现药物在肿瘤深部的精准释放，成为纳米医学领域亟待解决的关键问题。

南京医科大学附属无锡妇幼保健院的研究团队在《Materials Today Bio》发表了一项创新研究，设计了一种基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物-二硫键-聚乙二醇-谷氨酸（PLGA-SS-PEG-Glu）的双响应纳米平台，通过巧妙利用TNBC微环境中过表达的γ-谷氨酰转肽酶（GGT）和高浓度谷胱甘肽（GSH），实现了藤黄酸的高效递送和深层穿透。该平台在体外和体内实验中均展现出显著优于游离GA的抗肿瘤效果，并揭示了其通过氧化应激-线粒体凋亡通路发挥作用的分子机制。

研究团队采用多步合成法制备了GGT/GSH双响应聚合物PLGA-SS-PEG-Glu，通过核磁共振氢谱（¹H-NMR）和傅里叶变换红外光谱（FTIR）验证了结构。纳米平台通过透析法装载GA，透射电镜（TEM）显示其呈均匀球形（60-80 nm），动态光散射（DLS）测得水合粒径为153.58±1.31 nm，载药率达4.88±0.16%。使用4T1小鼠TNBC细胞系和BALB/c小鼠模型进行评估，实验包括近红外成像、流式细胞术、Western blot等技术。

GGT响应性电荷反转与GSH触发释放
纳米平台在生理环境下带负电（-17.7±0.43 mV），而在8 U/mL GGT作用下16小时内实现电荷反转。体外释放实验显示，10 mM GSH环境下48小时GA释放率达80%，远高于无GSH条件（20%），证实了双重刺激响应的特异性。

增强的肿瘤穿透与细胞摄取
共聚焦显微镜观察显示，Cy3标记的纳米平台在4T1细胞中4小时摄取量较0.5小时增加3.5倍（P<0.001）。抑制剂实验证实其通过小窝蛋白介导的内吞途径进入细胞，而GGT抑制剂GGsTop预处理使摄取减少68%（P<0.001）。

协同抗肿瘤机制
纳米平台处理组IC₅₀为0.80 μg/mL，显著低于游离GA（1.2 μg/mL）。其通过早期ROS爆发（3.2倍于对照组，P<0.001）激活Nrf2/HO-1通路，随后诱导线粒体凋亡（Bax/Bcl-2比值升高，caspase-3活化），最终导致40%细胞凋亡（游离GA组仅18%）。

体内靶向与疗效验证
近红外成像显示纳米平台在肿瘤部位24小时荧光强度达峰值，较非响应型载体高3倍（P<0.0001）。治疗两周后，肿瘤体积（220±53.56 mm³）和重量（0.26±0.058 g）较对照组减少82.09±4.02%，肺转移灶显著减少，且无显著系统毒性。

这项研究创新性地将GGT介导的电荷反转与GSH响应性释放相结合，解决了TNBC治疗中药物渗透与靶向释放的双重难题。其重要意义在于：1）首次利用Boc-L-谷氨酸-1-叔丁酯（Boc-Glu-OtBu）实现酶触发电荷反转；2）通过氧化应激-凋亡通路协同作用增强疗效；3）为其他实体瘤的纳米药物设计提供了范式。未来研究可进一步优化给药方案，并探索其在临床转化中的应用潜力。