基于抗糖基单克隆抗体的大鼠肠黏膜位点依赖性黏蛋白(Mucins)糖链特征解析

来自日本的研究人员针对肠道黏蛋白(Mucins)糖基化位点异质性分析难题，通过制备12种抗大鼠肠黏蛋白单克隆抗体(mAbs)，结合血型抗原树脂和糖神经酰胺脂(neoglycolipid)技术鉴定抗体表位，发现其可特异性识别血型相关抗原或未成熟O-糖链。免疫组化揭示肠段（空肠/回肠/近端结肠/远端结肠）特异性染色模式，抗体亲和层析成功分离出糖链组成多样的位点特异性黏蛋白，为研究肠道区域化糖链功能提供新型分子工具。

　　

肠道凝胶形成黏蛋白(Mucins)作为高分子量糖蛋白，其糖链结构随肠段位置呈现显著差异。尽管现有糖链分析手段有限，单克隆抗体(mAbs)技术展现出独特优势。研究者以大鼠肠黏蛋白为免疫原，成功获得12株单克隆抗体，通过血型抗原偶联树脂和黏蛋白糖链衍生的糖神经酰胺脂(neoglycolipid)分析系统，证实多数抗体靶向糖链表位——部分识别ABO血型系统相关抗原，另一些则特异性结合未成熟合成的黏蛋白型O-糖链。

免疫染色实验揭示抗体在空肠(jejunum)、回肠(ileum)、近端结肠(proximal colon)和远端结肠(distal colon)呈现梯度分布特征。利用抗体偶联柱进行亲和层析，成功从大鼠小肠黏蛋白中分离出糖链组成各异的亚群，暗示该方法可获取具有区域特异性的黏蛋白变体。这些携带位点特征性糖链的黏蛋白，可能通过糖链介导的分子互作参与肠道微环境调控。本研究开发的抗体工具箱，为解密肠道区域化生理功能提供了新型糖组学研究利器。