乙醇提取物黑骨藤与绿原酸通过抑制TLR4介导的神经炎症缓解缺血性脑卒中

本研究针对缺血性脑卒中(CIRI)中神经炎症的关键病理机制，通过构建MCAO/R大鼠模型和OGD/R细胞模型，结合网络药理学与代谢组学分析，首次揭示黑骨藤乙醇提取物(EEHGT)及其活性成分绿原酸(CGA)通过调控TLR4/PI3K-Akt/NF-κB信号轴发挥神经保护作用，为开发靶向抗炎的中风治疗策略提供新依据。

　　

缺血性脑卒中作为致死致残率最高的脑血管疾病，其核心病理机制——脑缺血再灌注损伤(CIRI)至今缺乏有效治疗手段。尽管临床尝试使用那他珠单抗(natalizumab)等抗炎药物，但疗效有限。传统苗药黑骨藤(Periploca forrestii Schltr.)在贵州苗族医学中素有"活血消痈"之效，其乙醇提取物(EEHGT)富含绿原酸(CGA)等活性成分，但具体作用机制尚未阐明。

辽宁省重点实验室联合多所高校的研究团队在《Phytomedicine》发表的研究，通过构建大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)大鼠模型和氧糖剥夺/复氧(OGD/R)细胞模型，结合LC-MS代谢组学和网络药理学分析，系统揭示了EEHGT的神经保护机制。研究采用TLR4基因敲除技术验证关键靶点，通过分子对接分析活性成分结合特性，并运用ELISA、Western blot等技术检测炎症因子和信号通路蛋白表达。

EEHGT减轻CIRI损伤
在MCAO/R模型中，EEHGT显著降低脑梗死体积，改善神经功能缺损评分；在OGD/R处理的SH-SY5Y细胞中，有效减少神经元凋亡。代谢组学分析发现EEHGT能逆转精氨酸、乳酸等炎症相关代谢物的异常水平。

TLR4介导的抗炎机制
网络药理学预测PI3K-Akt和NF-κB通路为关键通路。实验证实EEHGT通过激活PI3K-Akt促进细胞存活，同时抑制NF-κB信号转导，降低TNF-α、IL-6等促炎因子分泌。值得注意的是，TLR4基因敲除完全消除了EEHGT的抗炎效果。

绿原酸的靶向作用
分子对接显示CGA与TLR4结合能达-7.8 kcal/mol，其抑制小胶质细胞活化的效应同样依赖TLR4存在。这提示CGA是EEHGT发挥作用的药效物质基础之一。

该研究首次阐明EEHGT通过"多成分-多靶点-多通路"协同作用缓解CIRI，其中TLR4/PI3K-Akt/NF-κB信号轴的调控构成核心机制。这不仅为理解黑骨藤"活血消痈"的传统功效提供现代科学依据，更为开发基于天然产物的脑卒中靶向治疗策略开辟新途径。研究采用的"网络药理学-代谢组学-实验验证"整合研究模式，也为中药现代化研究提供了范式参考。