Cingulin（CGN）作为新型RNA结合蛋白通过IPO7介导的pERK核转位促进胰腺癌恶性进展的机制研究

本研究首次揭示紧密连接蛋白Cingulin（CGN）作为非经典RNA结合蛋白（RBP）通过稳定AXL和IPO7 mRNA激活MAPK/ERK信号通路，驱动磷酸化ERK（pERK）核转位，进而促进胰腺导管腺癌（PDAC）增殖、转移和化疗耐药。该发现为PDAC靶向治疗提供了新策略。

　　

CGN在PDAC中的表达特征与临床意义

研究通过TCGA和单细胞测序分析发现，CGN在胰腺导管腺癌（PDAC）中显著高表达，且与肿瘤分期进展和患者不良预后正相关。免疫组化显示CGN在PDAC组织中呈现梯度上调：正常腺泡细胞中主要定位于顶膜，而在腺泡-导管化生（ADM）、胰腺上皮内瘤变（PanIN）和PDAC中逐渐出现核定位。值得注意的是，CGN核积累程度与PDAC恶性程度呈正比，其过表达可独立预测患者总生存期缩短。

CGN驱动胰腺癌前病变和恶性转化

利用三种ADM模型（导管结扎、雨蛙素诱导和Kras^G12D/+转基因小鼠）证实，CGN在化生早期即被诱导表达。通过胰腺特异性腺相关病毒（pAAV）敲低CGN显著抑制ADM形成和纤维化反应。机制上，CGN通过下调腺泡标志物淀粉酶（Amy2a）和上调导管标志物CK19促进化生进程。在PDAC细胞中，CGN过表达促进细胞周期G1/S期转换（伴随CyclinD1上调和p21下调），增强迁移侵袭能力，并诱导上皮-间质转化（EMT）标志物（N-cadherin和Vimentin上调，E-cadherin下调）。

CGN通过AXL-IPO7双节点激活ERK信号轴

RNA-seq和RIP-seq联合分析发现，CGN作为非经典RBP通过其杆状结构域（1039-2328aa）结合AU富集元件，特异性稳定AXL和IPO7 mRNA。实验证实：

1. CGN与IPO7 mRNA 3'UTR两个保守区域（3439-3738bp和4581-4880bp）直接互作，突变AU motif后结合能力丧失
2. 电泳迁移率变动实验（EMSA）显示重组CGN蛋白可形成RNA-蛋白复合物
3. 放线菌素D处理证实CGN使AXL和IPO7 mRNA半衰期延长2-3倍

功能上，AXL通过激活MEK-ERK级联反应促进pERK生成，而IPO7作为核转运蛋白介导pERK入核。双重调控使ERK下游靶点（c-Fos/c-Jun/c-Myc/CCND1）持续激活，形成促癌正反馈环。临床样本显示CGN与AXL/IPO7表达高度共定位，三者共高表达患者预后最差。

治疗抵抗与转化价值

在吉西他滨（GEM）耐药模型中，CGN通过上调ABC转运蛋白（ABCG2/MRP1/MDR1）和维持ERK信号活性赋予PDAC细胞化疗抵抗性。动物实验证实，靶向沉默CGN可显著抑制原位移植瘤生长和肝转移，并逆转GEM耐药。该研究不仅揭示了TJ蛋白在RNA代谢中的新功能，更为PDAC提供了CGN-AXL-IPO7-ERK这一可成药靶标级联。

研究局限与展望

尽管鉴定出929个CGN结合转录本，但其在RNA剪接和核质运输中的广泛调控网络仍需解析。此外，CGN如何协调TJ结构维持与RNA结合的双重功能，以及是否存在组织特异性调控模式，将成为未来研究方向。