红刺桐来源的Erythrabyssin II（EL-19）通过抑制晚期自噬逆转卵巢癌顺铂耐药并促进凋亡

本研究针对卵巢癌（OC）顺铂（DDP）耐药难题，从红刺桐中筛选出新型自噬抑制剂Erythrabyssin II（EL-19）。研究发现EL-19通过阻断自噬体-溶酶体融合（不破坏溶酶体pH及水解酶活性）抑制化疗诱导的保护性自噬，显著增强A2780/DDP细胞对DDP的敏感性。体内外实验证实EL-19与DDP联用具有协同抗肿瘤效应，为克服卵巢癌耐药提供了天然产物候选药物。论文发表于《iScience》。

　　

卵巢癌作为妇科恶性肿瘤中的"隐形杀手"，五年生存率长期停滞不前，其中化疗耐药是治疗失败的主因。当癌细胞遭遇顺铂等化疗药物时，会激活自噬（autophagy）——这种细胞"自我消化"机制本用于清除损伤组分，却成为癌细胞的"保护伞"，通过循环利用胞内物质帮助其抵抗药物杀伤。目前临床唯一可用的自噬抑制剂氯喹（CQ）存在视网膜毒性等局限，迫使科学家在天然产物中寻找更优解。

福建医科大学附属肿瘤医院联合福州大学的研究团队将目光投向热带植物红刺桐（Erythrina crista-galli Linn），从其提取物中筛选出异黄酮类化合物Erythrabyssin II（EL-19）。通过卵巢癌细胞系（A2780及其耐药株A2780/DDP）、患者来源类器官及裸鼠移植瘤模型的多维度研究，团队发现EL-19能特异性阻断自噬流（autophagic flux）的晚期阶段：免疫荧光显示LC3B与溶酶体标记蛋白LAMP1的共定位显著减少，透射电镜观察到自噬体堆积但无法与溶酶体融合。值得注意的是，与传统抑制剂巴弗洛霉素A1（BafA1）不同，EL-19不影响溶酶体酸化环境（LysoTracker染色证实）及组织蛋白酶（CTSB/CTSD）活性，这种精准干预机制为其安全性奠定基础。

关键实验技术
研究采用Western blot检测LC3-II/p62蛋白表达水平，mRFP-GFP-LC3双荧光病毒追踪自噬流，流式细胞术（CYTO-ID试剂盒）量化自噬水平。建立顺铂耐药株A2780/DDP细胞模型及患者来源卵巢癌类器官（含肿瘤组织与腹水来源两种），通过CCK8、克隆形成和Annexin V/PI凋亡实验评估药物敏感性。裸鼠移植瘤实验结合免疫组化（Ki67/TUNEL）验证体内疗效。

EL-19是新型自噬调节剂
剂量依赖性实验显示EL-19引起细胞空泡化，显著提升LC3-II和p62蛋白积累（

）。与阳性对照CQ类似，EL-19处理组GFP-LC3荧光斑点增加，透射电镜观察到包裹待降解物质的自噬体堆积，证实其自噬阻滞作用。

精准阻断自噬体-溶酶体融合
在RAPA诱导自噬背景下，EL-19仍能进一步增加LC3-II水平，但无法叠加CQ的效果，提示其作用于自噬晚期（

）。mRFP-GFP-LC3实验中黄色斑点（未降解自噬体）的增多，以及STX17（自噬体成熟关键蛋白）与LC3B共定位的减少，共同证明EL-19通过干扰SNARE复合体组装抑制膜融合。

协同化疗的转化价值
在耐药细胞中，EL-19（10μM）使顺铂IC₅₀降低约3倍，凋亡率提升2.5倍（p<0.001）。类器官实验显示EL-19抑制活性与CQ相当（IC₅₀ 11.69 vs 9.458μM），但无溶酶体毒性。裸鼠实验中联用组肿瘤体积较单药组减少58%（p<0.0001），且未出现顺铂导致的肾损伤（

）。

该研究首次揭示红刺桐来源EL-19作为新型自噬抑制剂的独特机制：选择性阻断膜融合而不破坏溶酶体功能。这种"精准制动"策略既克服了传统抑制剂毒性大的缺陷，又通过逆转保护性自噬使耐药细胞重新敏化。尤为重要的是，类器官模型证实其对临床样本的有效性，为天然产物抗肿瘤药物开发提供了范式。未来研究可进一步探索EL-19结构修饰以优化药效，并拓展其在其他耐药肿瘤中的应用。