转录组测序揭示非典型甲状旁腺肿瘤的分子亚型及其临床意义

本研究针对非典型甲状旁腺肿瘤(APT)诊断与预后评估的临床难题，通过转录组测序和聚类模型分析16例APT样本，成功区分癌症型与腺瘤型亚型。研究发现癌症型APT患者更年轻且钙/PTH水平更高，并首次报道CDC73双等位基因突变病例。该研究为APT风险分层提供了分子依据，对临床监测策略制定具有重要指导意义。

　　

甲状旁腺肿瘤是内分泌系统的重要疾病，其中非典型甲状旁腺肿瘤(APT)因其介于良恶性之间的特殊性质，一直是临床诊断和治疗的难点。这类肿瘤占原发性甲状旁腺功能亢进(PHPT)病例的约1%，与甲状旁腺癌发病率相当，但其生物学行为和预后存在高度不确定性。传统病理学诊断标准难以准确预测APT的恶性潜能，而现有的免疫组化标记物如parafibromin、PGP9.5等敏感性和特异性均不理想。更棘手的是，APT患者临床表现差异显著——部分病例呈现与甲状旁腺癌相似的重度高钙血症和PTH水平升高，但术后随访却显示良性病程；而另一些最初表现温和的病例反而出现远期复发。这种临床-病理学的不一致性使得医生难以制定个体化的随访方案，部分高危患者可能错失早期干预时机，而低危患者又可能承受不必要的频繁检查。

为破解这一临床困境，来自延世大学Severance医院的研究团队创新性地将转录组测序技术应用于APT分子分型研究。团队基于前期建立的597个癌特异性差异表达基因(DEG)聚类模型，对16例经病理确诊的APT样本进行系统分析，相关成果发表在《Endocrine-Related Cancer》。研究通过整合转录组数据、临床特征和免疫组化结果，首次证明APT存在明确的分子亚型，且这些亚型与临床表现高度吻合。

研究主要采用以下关键技术：1) 基于GRCh38参考基因组的RNA-seq测序和STAR2比对；2) 针对597个DEG的层次聚类分析；3) CDC73变异检测(包括全外显子测序验证)；4) 多标记免疫组化panel(parafibromin/WT1等)；5) 273例甲状旁腺腺瘤对照队列的临床数据对比。

研究结果

基线特征
16例APT患者中位年龄49.5岁，62.5%为女性。聚类分析将4例(25%)划分为癌症型APT，12例(75%)为腺瘤型。癌症型患者显著更年轻(中位30.0岁 vs 56.5岁)，且具有更高的校正钙(12.6 vs 10.9 mg/dL)和PTH水平(800.8 vs 134.8 pg/mL)。肿瘤大小分析显示癌症型APT最长径达2.4cm，显著大于其他组别。

分子特征
转录组分析揭示癌症型APT与经典甲状旁腺癌的基因表达谱高度相似(R=0.84)，均显示细胞外基质重塑和类固醇代谢通路富集。尤为重要的是，在1例癌症型APT患者(病例9)中首次通过RNA-seq和WES双重验证发现CDC73基因的双等位基因突变(c.15delT/c.376C>T)，该突变导致parafibromin蛋白完全缺失。

免疫组化特征
传统标记物中仅病例9显示parafibromin缺失，而新型标记物WT1在其肿瘤组织中呈阳性表达。值得注意的是，所有癌症型APT均表现PGP9.5/galectin-3阳性，但这些标记在腺瘤型中也有较高表达率，提示其特异性有限。

临床转归
中位随访32个月期间，病例15(癌症型)出现术后PTH持续升高(189.0 pg/mL)，但影像学未发现明确复发灶。其余患者均保持生化缓解，包括携带CDC73双突变的病例9。

讨论与意义
该研究首次通过分子证据证实APT存在本质异质性，其癌症型亚型在基因表达谱、临床特征和部分病例的CDC73突变特征等方面与甲状旁腺癌高度相似。这一发现为理解APT的生物学本质提供了新视角——它们并非单一疾病实体，而是包含不同恶性潜能亚型的谱系疾病。

研究建立的转录组分类模型展现出显著的临床转化价值：① 能识别出具有"癌症样"特征的APT患者，这类患者年龄更轻、生化指标更严重，可能需要更密切的长期监测；② 发现WT1可能作为CDC73突变型肿瘤的新型辅助标记物；③ 首次在APT中报道CDC73双等位基因突变病例，为分子机制研究提供重要线索。

尽管研究存在样本量有限、随访期较短等局限性，但其创新性地将高通量测序技术与临床决策需求相结合，为APT精准医疗奠定了基础。未来研究可扩大样本量并延长随访，进一步验证该分类系统的预后预测价值，同时探索WT1等新型标记物的临床应用潜力。这项发表于权威期刊的工作，不仅为内分泌肿瘤领域贡献了重要的分子分型工具，更展示了多组学整合研究在解决临床难题中的独特价值。