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双功能竞争抗原增强型DLS免疫传感器超灵敏检测减肥产品中的呋塞米
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年06月29日 来源:Food Chemistry 8.5
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为解决减肥产品中非法添加利尿剂呋塞米(Furo)的检测难题,南昌大学团队开发了基于双功能竞争抗原(Furo@BSA@GA)和硼酸亲和反应的动态光散射(DLS)免疫传感器。该传感器通过单克隆抗体修饰磁珠(MNP@mAbs)捕获目标物,利用多价苯硼酸标记BSA(PBA@BSA)触发探针聚集,检测限低至196.33 fg·mL?1,灵敏度较传统ELISA提升1251倍,耗时仅25分钟,为食品安全监管提供了高效工具。
肥胖已成为全球公共卫生危机,世界卫生组织数据显示,全球39%的成年人超重,13%肥胖。减肥产品中非法添加的利尿剂呋塞米通过促进水分排出制造“快速瘦身”假象,但会导致电解质紊乱甚至心律失常。传统检测方法如高效液相色谱(HPLC)成本高,而酶联免疫吸附试验(ELISA)灵敏度有限(μg·mL?1级)。南昌大学研究团队在《Food Chemistry》发表论文,提出一种革新性解决方案——双功能竞争抗原增强动态光散射(BCA-DLS)免疫传感器。
研究采用三大关键技术:1)合成含呋塞米抗原表位和没食子酸(GA)顺式二醇结构的双功能竞争抗原(Furo@BSA@GA);2)制备单克隆抗体修饰磁珠(MNP@mAbs)作为DLS探针;3)利用多价苯硼酸标记BSA(PBA@BSA)触发高效聚集反应。通过30份减肥产品样本验证,并与HPLC方法比对。
材料与仪器
采用180 nm磁纳米颗粒(MNPs)和BSA等基础材料,通过紫外-可见吸收光谱和傅里叶变换红外光谱(FTIR)表征抗原结构。
双功能竞争抗原的合成与表征
将GA的羧基与Furo@BSA的氨基共价偶联,FTIR证实GA成功引入,紫外光谱显示Furo与BSA偶联比为12:1,GA与BSA为35:1,保留抗原活性和顺式二醇结构。
结论
该传感器通过硼酸亲和反应将检测限降至196.33 fg·mL?1,较ELISA提升3个数量级,且检测时间缩短至25分钟。在30份减肥产品中回收率达92.4%-106.8%,与HPLC结果高度一致(R2=0.997)。
讨论
研究突破传统DLS依赖抗原-抗体低亲和力(Kd 10?7-10?9 M)的局限,通过引入顺式二醇-硼酸高效共价反应(结合常数达10?3 M级),显著提升探针聚集效率。该设计可拓展至其他小分子检测,为食品安全监管提供普适性方法。国家自然科学基金和江西省重点研发计划支持的研究成果,已申请专利保护。
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