水牛角中烟酸通过双重抗病毒与抗炎作用缓解H1N1诱导的急性肺损伤：生物活性导向的发现

为解决H1N1流感病毒肺炎治疗中耐药性和免疫抑制等局限性，复旦大学研究人员通过生物活性导向分离策略，从传统中药水牛角（Bubali Cornu）中鉴定出烟酸（NA），证实其通过抑制病毒复制、减少巨噬细胞/中性粒细胞过度募集及下调NOS2表达，显著缓解H1N1诱导的急性肺损伤（ALI），为动物源性中药的现代化抗病毒应用提供新依据。

　　

流感病毒H1N1引发的急性肺损伤（ALI）以其高传染性、严重肺部炎症和高死亡率成为全球公共卫生威胁。尽管现有疗法如奥司他韦和糖皮质激素被广泛应用，但耐药性和免疫抑制等副作用限制了其疗效。传统中药（TCM）复方（如犀角地黄汤）在临床中展现出多靶点治疗潜力，但其动物源性成分水牛角（Bubali Cornu, BC）的活性物质基础与机制尚不明确。这一空白阻碍了BC的标准化应用与现代机制验证。

复旦大学的研究团队通过生物活性导向分离策略，结合硅胶柱层析和高效液相色谱（HPLC）技术，从BC的乙酸乙酯部位（EAF）中分离出13种化合物，其中烟酸（Nicotinic Acid, NA）表现出最强的体外抗H1N1活性。在H1N1感染的ALI小鼠模型中，NA治疗显著降低肺指数、改善肺组织病理形态，并通过流式细胞术证实其减少巨噬细胞和中性粒细胞的过度浸润，从而缓解“炎症风暴”。网络药理学（NP）分析与qPCR筛选发现，NA下调肺组织中NOS2（诱导型一氧化氮合酶）和NOX1（NADPH氧化酶1）的mRNA水平，而Western blot进一步验证NA选择性抑制NOS2蛋白表达。在H1N1感染的RAW264.7巨噬细胞中，NA同样显著抑制NOS2，提示其通过调控肺巨噬细胞的NOS2通路发挥治疗作用。

关键实验技术：研究采用生物活性导向分离（硅胶柱层析、HPLC）、H1N1小鼠ALI模型、流式细胞术、网络药理学、qPCR及Western blot。实验动物来自上海斯莱克实验动物有限公司，细胞系为RAW264.7巨噬细胞。

研究结果

1. 活性部位筛选：BC的EAF显著减轻H1N1感染小鼠的肺水肿和炎症因子（TNF-α、IL-6）释放。
2. 化合物鉴定：从EAF中分离的NA在体外抑制H1N1复制，半数抑制浓度（IC₅₀）为28.3 μM。
3. 体内疗效：NA治疗降低ALI小鼠肺指数（27.6%），减少支气管周围炎性浸润。
4. 免疫调控：NA使肺泡灌洗液中巨噬细胞比例下降14.3%，中性粒细胞减少21.8%。
5. 机制验证：NA通过抑制NOS2而非NOX1表达，阻断H1N1诱导的氧化应激与炎症反应。

结论与意义：该研究首次揭示BC中NA通过双重抗病毒（直接抑制H1N1）和抗炎（靶向NOS2-巨噬细胞轴）作用缓解ALI，填补了动物源性TCM抗流感机制的空白。其创新性在于将传统中药的“清热解毒”特性与现代分子靶点（如NOS2）明确关联，为开发低耐药性抗流感药物提供了新思路。论文发表于《Journal of Ethnopharmacology》，为TCM的现代化研究范式提供了重要参考。