PARP/CDK6双靶点抑制剂通过调控Wnt/β-catenin信号通路治疗BRCA野生型三阴性乳腺癌的设计与合成

为解决BRCA野生型三阴性乳腺癌（TNBC）缺乏有效靶向治疗的难题，研究人员设计并合成了新型PARP/CDK6双靶点抑制剂KWZY-11。该化合物通过诱导DNA损伤、抑制Wnt/β-catenin通路显著抑制肿瘤增殖和转移，且无显著毒性，为TNBC治疗提供了新策略。

　　

三阴性乳腺癌（TNBC）因缺乏雌激素受体、孕激素受体和HER2表达，治疗选择极为有限。尽管PARP抑制剂在BRCA突变患者中疗效显著，但对占多数的BRCA野生型TNBC效果不佳。近年研究发现，CDK4/6抑制剂可通过破坏同源重组修复（HR）途径产生"合成致死"效应，这为PARP抑制剂在HR功能正常肿瘤中的应用提供了新思路。然而，单一靶向治疗易产生耐药性，且现有联合用药方案存在毒性叠加风险。

针对这一挑战，研究人员开发了首个PARP/CDK6双靶点抑制剂KWZY-11。通过结构-活性关系（SAR）研究优化得到的化合物11，在MDA-MB-231细胞模型中展现出双重抑制活性：既能阻断PARP介导的DNA损伤修复，又可通过抑制CDK6诱导HR缺陷。实验证实，11可显著增加γ-H2AX（DNA损伤标志物）表达，诱导肿瘤细胞凋亡。更值得注意的是，该化合物通过下调β-catenin核转位，有效抑制Wnt通路活性，从而阻断肿瘤增殖和转移的关键信号。在体内实验中，11表现出优异的抗肿瘤效果和生物安全性，为BRCA野生型TNBC提供了兼具机制创新性和临床转化潜力的治疗候选物。

研究采用的主要技术包括：1）基于结构的药物设计优化PARP/CDK6双效抑制剂；2）体外酶活性和细胞增殖抑制实验评估化合物效力；3）流式细胞术检测细胞周期和凋亡；4）免疫荧光和Western blot分析DNA损伤及通路蛋白表达；5）异种移植模型评估体内抗肿瘤效果。

关键研究结果

1. 双靶点抑制剂的理性设计
   通过分子对接和SAR分析，将PARP抑制剂骨架与CDK6药效团整合，获得先导化合物11（KWZY-11），其对PARP1和CDK6的IC₅₀分别达到1.2 nM和8.7 nM。

2. DNA损伤与凋亡诱导
   11处理后的MDA-MB-231细胞中，γ-H2AX焦点形成增加3.5倍，caspase-3活性提升4.2倍，证实其通过双重机制引发合成致死效应。

3. Wnt通路调控机制
   11使β-catenin核定位降低62%，同时下调c-Myc和cyclin D1表达，揭示其通过表观遗传调控抑制肿瘤干细胞特性。

4. 体内抗肿瘤效果
   在TNBC小鼠模型中，11治疗组肿瘤体积减少78%，肺转移结节数下降90%，且未出现体重减轻或血液学毒性。

这项研究首次证实PARP/CDK6双靶向抑制可通过调控Wnt/β-catenin通路克服BRCA野生型TNBC的治疗瓶颈。KWZY-11的创新性在于将DNA损伤修复抑制与细胞周期调控、表观遗传重塑三重机制融于单一分子，不仅避免了联合用药的毒性问题，更为开发"多靶点协同干预"的抗癌策略提供了范式。该成果发表于《Journal of Medicinal Chemistry》，为临床转化研究奠定了坚实基础。