慢性应激通过PV中间神经元GluK1-KAR驱动的GABAB受体抑制调控杏仁核兴奋性与焦虑行为

本研究针对慢性应激如何通过杏仁核PV中间神经元GluK1-KAR（红藻氨酸受体）调控GABAB受体介导的紧张性抑制，进而导致焦虑行为的机制展开。研究人员发现慢性束缚应激（CRS）下调PV中间神经元GluK1表达，解除其对LA（外侧杏仁核）锥体神经元的紧张性抑制，导致杏仁核过度兴奋并促进CeL（中央杏仁核外侧区）PKCδ+神经元突触传递增强。该研究揭示了应激性焦虑的神经环路新靶点，为靶向干预提供理论依据。

　　

杏仁核过度兴奋是应激诱发焦虑障碍的核心特征，但其中PV（小清蛋白）中间神经元如何通过特定受体调控局部环路仍不明确。既往研究表明，慢性应激会削弱杏仁核GABA能抑制，但究竟是哪类中间神经元亚群、通过何种分子机制影响杏仁核输出，尚存争议。尤其值得注意的是，杏仁核内PV中间神经元与锥体神经元的动态平衡对情绪调控至关重要，而谷氨酸能KAR（红藻氨酸受体）在此过程中的作用鲜有报道。

为解决这些问题，赫尔辛基大学Maria Ryazantseva团队在《Molecular Psychiatry》发表研究，首次揭示PV中间神经元通过GluK1-KAR驱动GABA_B受体介导的紧张性抑制（tonic inhibition）调控杏仁核兴奋性。研究发现，慢性束缚应激（CRS）会特异性下调PV中间神经元GluK1表达，导致其对LA锥体神经元的紧张性抑制减弱，进而增强LA-CeL PKCδ⁺神经元的谷氨酸能输入。基因敲除实验证实，选择性敲除PV中间神经元GluK1可赋予小鼠对CRS诱导的焦虑样行为的抵抗性。

关键技术方法
研究采用慢性束缚应激（CRS）小鼠模型，结合PV-Cre::Grik1^fl/fl条件性基因敲除小鼠，通过全细胞膜片钳记录LA锥体神经元和PV中间神经元电生理特性，利用光遗传学调控PV神经元活性，结合三重荧光原位杂交（ISH）定位GluK1表达。通过DREADD技术抑制BLA（基底外侧杏仁核）锥体神经元活动，分析CeL PKCδ⁺神经元突触传递变化。

主要研究结果

1. 慢性应激削弱GABA_B受体介导的紧张性抑制
电生理记录显示，CRS处理小鼠的LA锥体神经元兴奋性显著增强，表现为动作电位发放频率增加和静息膜电位去极化。关键发现是GABA_B受体拮抗剂CGP55845诱发的紧张性电流在CRS组减小，且该电流依赖G蛋白信号（GDP-β-S可阻断），说明CRS通过减弱紧张性GABA_B抑制导致神经元过度兴奋。

2. GluK1-KAR通过PV中间神经元维持紧张性抑制
在PV特异性敲除GluK1的小鼠（PV-Cre::Grik1^fl/fl）中，GABA_B紧张性电流幅度显著降低，且KAR拮抗剂ACET不再影响锥体神经元兴奋性。光遗传学实验证实，GluK1-KAR通过促进PV神经元动作电位依赖性和异步GABA释放（asynchronous release）维持紧张性抑制。

3. 慢性应激特异性下调PV神经元GluK1表达
三重ISH显示，CRS组PV⁺神经元中Grik1 mRNA表达量和阳性细胞比例显著降低，而其他GABA能神经元亚型无此变化。电生理证实CRS处理后的PV神经元对KAR拮抗剂ACET和LY382884无反应，说明功能性GluK1-KAR表达缺失。

4. 应激通过解除抑制增强CeL PKCδ⁺环路活性
CRS选择性地增加CeL PKCδ⁺神经元的自发性兴奋性突触电流（sEPSC）频率，化学遗传学抑制BLA锥体神经元可逆转该效应。值得注意的是，ACET仅在对照组增强PKCδ⁺神经元sEPSC，说明GluK1-GABA_B通路通过调控LA输出影响下游环路。

5. GluK1缺失赋予应激抵抗性
PV-Cre::Grik1^fl/fl小鼠在CRS后未出现LA锥体神经元过度兴奋或焦虑样行为（开放场中心停留时间无变化），且其PV神经元兴奋性不受CRS影响，证实GluK1是应激敏感性的关键分子开关。

研究意义
该研究首次阐明PV中间神经元GluK1-KAR通过紧张性GABA_B抑制动态调控杏仁核兴奋性的新机制：生理状态下，GluK1被环境谷氨酸持续激活，促进PV神经元释放GABA，通过GABA_B受体维持锥体神经元抑制性张力；慢性应激则破坏这一平衡，导致杏仁核-CeL PKCδ⁺环路过度激活。这一发现不仅为理解应激相关焦虑的神经环路机制提供新视角，更提示靶向PV神经元GluK1-KAR或GABA_B受体可能是干预应激障碍的新策略。研究采用的PV神经元特异性基因操作与环路分析范式，为神经精神疾病的精准干预提供了方法论参考。