基于非靶向UHPLC-Q Orbitrap HRMS网络药理学联合实验验证的海岸密花豆茎部抗乳腺癌活性成分发现

本研究针对海岸密花豆(Spatholobus littoralis)传统抗乳腺癌应用机制不明的问题，通过UHPLC-Q-Orbitrap-HRMS非靶向分析结合网络药理学和分子对接技术，鉴定其70%乙醇提取物水溶性组分中的活性成分，发现10个乳腺癌相关靶点及EGFR酪氨酸激酶抑制通路，实验验证IC50达121.66 μg/mL，为天然抗乳腺癌药物开发提供新依据。

　　

乳腺癌作为威胁女性健康的重大疾病，传统化疗药物存在选择性差、副作用大等问题。印度尼西亚加里曼丹岛的达雅克部落长期使用海岸密花豆(Spatholobus littoralis)治疗乳腺癌，但其活性成分和作用机制尚未阐明。这种传统草药与现代医学间的"经验-机制"鸿沟，成为天然药物开发的关键瓶颈。

为解决这一问题，国内某研究机构的研究人员开展了系统性研究。通过结合现代分析技术与计算生物学方法，首次揭示了海岸密花豆茎部提取物的抗乳腺癌物质基础与分子机制。研究成果发表在《Natural Product Research》，为传统草药的科学化应用提供了范式。

研究采用四大关键技术：1) UHPLC-Q-Exactive Orbitrap高分辨质谱(HRMS)非靶向成分分析；2) 基于公共数据库(TCMSP、PharmMapper等)的网络药理学靶点预测；3) AutoDock等软件的分子对接验证；4) MTT法细胞毒性实验(IC₅₀测定)。实验样本为海岸密花豆茎部70%乙醇提取物的水溶性组分。

活性成分鉴定
通过HRMS技术从水溶性组分中鉴定出多种黄酮类、酚酸类化合物，质谱数据经Compound Discoverer软件处理，结合mzCloud数据库匹配，获得精确分子量和结构信息。

网络药理学分析
构建"成分-靶点-疾病"交互网络，PPI分析识别出10个核心靶点(如EGFR、AKT1等)，KEGG富集显示这些靶点显著富集于乳腺癌通路(p<0.05)，提示可能通过调控肿瘤细胞增殖和凋亡发挥作用。

分子对接验证
对关键成分与EGFR酪氨酸激酶(PDB:1M17)进行对接，结合能介于-5.7至-7.5 kcal/mol，其中异黄酮类化合物与ATP结合口袋形成稳定氢键，理论验证了其抑制活性。

实验验证
MTT实验显示水溶性组分对MCF-7细胞的IC₅₀为121.66 μg/mL，显著优于粗提物。流式细胞术证实该组分可诱导肿瘤细胞周期阻滞在G2/M期，Western blot检测到EGFR磷酸化水平下降，与预测机制一致。

该研究首次建立了海岸密花豆"化学成分-分子靶点-药理活性"的完整证据链，不仅证实了传统用药的科学性，更发现其通过多靶点调控乳腺癌关键通路的特点。特别值得注意的是，研究中发现的EGFR酪氨酸激酶抑制机制，为克服现有靶向药物的耐药性提供了新思路。这种将高分辨质谱、计算生物学与实验验证相结合的研究策略，为其他传统草药的现代化研究提供了可借鉴的方法学框架。