基于体外与计算机模拟的甜荚果提取物抑制胰脂肪酶活性及抗氧化作用研究

本研究针对脂代谢相关疾病防治需求，通过筛选巴西半干旱地区五种水果（甜荚果、三敛果、太平洋李等），发现甜荚果（Pithecellobium dulce）提取物具有显著胰脂肪酶（PL）抑制活性和抗氧化特性。采用HPLC-ESI-MSn技术鉴定出黄酮类化合物（紫云英苷、槲皮苷等），并通过分子对接证实其与胰脂肪酶（PDB 1ELM）活性位点有效结合，为天然产物开发降脂药物提供新思路。

　　

在肥胖症和代谢综合征全球流行的背景下，胰脂肪酶（Pancreatic Lipase, PL）作为膳食脂肪消化的关键酶，成为药物开发的重要靶点。虽然奥利司他（Orlistat）等化学抑制剂已应用于临床，但其副作用促使科研人员转向天然产物筛选。巴西半干旱地区丰富的植物资源长期被当地居民用作传统药物，但其活性成分和作用机制缺乏系统研究。

研究人员针对这一科学问题，选取该地区五种特色水果（甜荚果Pithecellobium dulce、三敛果Averrhoa bilimbi、太平洋李Spondias dulcis等）进行系统比较。通过体外酶抑制实验发现，甜荚果提取物表现出最强的PL抑制活性（IC₅₀值显著低于其他样本）。进一步采用高效液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC-ESI-MSⁿ）技术，鉴定出三种关键黄酮类化合物：紫云英苷（astragalin）、槲皮苷（quercitrin）和山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（afzelin）。分子对接模拟显示，这些化合物能通过氢键和疏水作用与PL活性中心（PDB ID 1ELM）的Ser¹⁵²、Asp⁷⁹等关键氨基酸残基稳定结合，其结合能优于已知抑制剂奥利司他。

关键技术包括：1）体外PL抑制活性测定（比色法）；2）HPLC-ESI-MSⁿ成分分析；3）分子对接模拟（AutoDock工具）；4）抗氧化活性评估（DPPH和ABTS法）。所有植物样本均采集自巴西半干旱地区并经分类学鉴定。

研究结果部分：

1. 体外活性筛选：甜荚果提取物对PL的抑制率高达78.3%，显著优于阳性对照（p<0.01）
2. 成分鉴定：通过质谱碎片离子分析（m/z 447→285）确认黄酮苷结构
3. 计算机模拟：槲皮苷与PL的Glu¹⁴¹形成强氢键（键长1.8?）
4. 构效关系：糖基化位置影响抑制活性，C-3位鼠李糖基化（afzelin）增强疏水相互作用

结论表明，甜荚果中的黄酮类化合物通过双重机制（酶活性位点竞争性抑制和自由基清除）发挥降脂作用。该研究不仅为开发新型植物源PL抑制剂提供先导化合物，也为巴西传统药用植物的现代化应用奠定科学基础。论文发表于《Natural Product Research》，其创新性在于首次将计算机辅助药物设计（CADD）与民族植物学研究相结合，为天然产物研究提供范式参考。