Rhoifolin增强阿霉素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的协同抗癌作用及机制研究

【编辑推荐】为解决三阴性乳腺癌(TNBC)化疗耐药及阿霉素(Dox)毒性问题，研究人员首次揭示柑橘类黄酮rhoifolin通过调控caspase 3/Bax/Bcl-2通路显著增强Dox疗效（组合指数CI<1），使Dox剂量降低25倍，同时抑制细胞迁移(伤口愈合率降至16.5±8.0%)并促进凋亡（caspase 3表达提升22.2倍），为天然产物辅助化疗提供新策略。

　　

在全球癌症治疗领域，三阴性乳腺癌(TNBC)因其缺乏雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER2)表达，成为临床治疗的"顽固堡垒"。这类占乳腺癌新发病例24%的亚型，不仅对靶向治疗无响应，还易发生早期转移。阿霉素(Doxorubicin, Dox)作为临床一线化疗药物，虽对TNBC有效，但其致命的心脏毒性和高达50%的耐药率迫使医生在疗效与安全性间艰难权衡。

转机可能藏在自然界中——柑橘类植物富含的类黄酮化合物rhoifolin，此前已被发现具有广谱抗癌活性且对正常细胞无害。但究竟这种天然分子能否成为Dox的"增效减毒"搭档？来自未知研究机构的Ahmad Saleh Al-Radaideh团队在《PHARMACIA》发表的研究给出了肯定答案。

研究人员采用MTT法测定半数抑制浓度(IC₅₀)、CompuSyn软件计算组合指数(CI)、划痕实验评估细胞迁移、克隆形成实验检测肿瘤干细胞样特性，以及qPCR分析凋亡相关基因表达。所有实验均使用ATCC来源的MDA-MB-231细胞系，每组设置三次重复。

细胞增殖实验显示：
Dox单药IC₅₀为6.22 μM，而rhoifolin达102 μM。但两者以1:8比例组合时产生惊人协同效应(CI=0.039)，使Dox剂量降低25.77倍。这种"1+1>2"的效果在1:2和1:4比例组合中同样显著(CI均<1)。

细胞迁移抑制方面：
1.5 μM Dox联合50 μM rhoifolin使伤口闭合率从单药的63.6±11.6%骤降至27.6±4.6%(p<0.01)，而该剂量rhoifolin单独使用无显著效果，证明其特异性增效作用。

克隆形成能力检测发现：
50 μM rhoifolin单药即可将克隆数从对照组的202±9个压制至72.5±8.5个，而所有Dox组合方案则完全抑制克隆形成，提示该方案可根除肿瘤干细胞样群体。

凋亡机制解析揭示：
3 μM Dox联合50 μM rhoifolin使caspase 3表达暴增22.2倍，远超单药效果(5倍)。同时促凋亡因子Bax表达上调，而抗凋亡蛋白Bcl-2变化呈现复杂调控模式。

这项研究突破性地证明：rhoifolin可通过多重机制增强Dox抗TNBC效果。首先，它打破癌细胞"防御工事"，使Dox能以更低剂量(降幅达25倍)发挥更强杀伤力；其次，通过激活caspase 3凋亡通路显著提升癌细胞"自杀"率；最后，有效遏制癌细胞转移和再生能力。尤为可贵的是，rhoifolin对正常细胞的天然安全性，为破解Dox心脏毒性难题提供新思路。

尽管该研究尚未阐明rhoifolin是否影响多药耐药蛋白(MDR1/P-gp)，但其在MRP1转运调控中的已有证据提示更广阔的应用前景。未来研究可进一步探索该组合在动物模型中的效果，以及rhoifolin对其他化疗药物的普适性增效作用。这项成果为开发基于天然产物的化疗增敏剂奠定了重要基础，也为TNBC患者带来了降低治疗毒副作用的希望曙光。