集成化微流控芯片在细胞裂解与DNA纯化中的创新应用及高效混合机制研究

【字体: 时间:2025年06月30日 来源:Results in Engineering 6.0

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  研究人员针对传统细胞裂解和DNA纯化技术操作繁琐、效率低下的问题,开发了一种集成化微流控装置。该装置结合蛇形微混合器与内外屏障结构,实现了98.95%的混合效率,并通过化学-热协同裂解和硅胶过滤技术,将DNA提取效率提升至97.13%。PCR和电泳验证表明,该平台为临床分子诊断提供了自动化、低成本的高效解决方案。

  

在生命科学和医学诊断领域,细胞裂解(Cell Lysis)和DNA纯化是分子检测的关键步骤,但传统方法存在耗时长、操作复杂、样本需求量大等问题。随着微流控技术(Microfluidics)的发展,其微型化、自动化和高效的特点为解决这些问题提供了新思路。然而,现有微流控设备在混合效率、集成度和成本控制方面仍有局限。为此,研究人员设计了一种创新性集成微流控平台,通过多机制协同作用实现了细胞裂解与DNA纯化的高效整合。

为验证该技术的可行性,研究团队设计了一种结合蛇形通道(Serpentine Micromixer)与内外屏障结构的被动微混合器,通过计算流体力学(CFD)模拟和实验验证了其混合效率。采用化学裂解(蛋白酶K结合缓冲液)与65°C热裂解协同作用处理成纤维细胞、MCF-7和白细胞(WBC)三种样本,并通过硅胶过滤器完成DNA捕获。关键实验技术包括:软光刻技术制备PDMS微通道、PID温控系统实现精准加热、纳米滴度仪(Nanodrop)定量DNA浓度,以及PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳验证DNA质量。

研究结果部分:

  1. 微混合器性能验证:通过红蓝染料和FITC荧光标记实验,证实混合效率达98.95%,与CFD模拟结果仅相差1.01%。内外屏障结构通过产生Dean流(次级涡流)显著提升流体接触面积。
  2. 细胞裂解效率:Live/Dead测试显示出口样本中无存活细胞,裂解效率达100%。加热仓设计确保裂解液在65°C维持10分钟,避免DNA链断裂。
  3. DNA提取质量:纳米滴检测显示DNA浓度76.437 ng/μL(A260/A280比值1.846),符合PCR要求。与常规方法相比,设备效率达97.13%,且单日可处理12-14个样本。
  4. 下游应用验证:PCR扩增出483 bp(性别决定基因)和346 bp(精神健康相关位点)条带,电泳结果清晰,证实DNA完整性。

结论部分强调,该平台通过创新性结构设计实现了细胞裂解与DNA纯化的无缝衔接,其核心优势包括:混合效率较同类设备提升近20%,采用可替换滤膜降低耗材成本,且全流程自动化减少人为误差。未来结合电子阀控和AI远程调控可进一步优化系统精度。论文发表于《Results in Engineering》,为发展中国家临床分子诊断提供了高性价比的技术方案。

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