基于维生素E的水包油纳米乳佐剂增强伪狂犬病病毒灭活疫苗免疫原性的研究

伪狂犬病病毒(PRV)灭活疫苗因免疫原性不足导致保护效果受限。江苏省农业科学院团队开发了一种新型水包油(O/W)纳米乳佐剂OEBB（含20%维生素E），通过增强抗原呈递细胞活化和CD4+/CD8+ T细胞分化，显著提升小鼠和仔猪模型中和抗体水平（保护率达80%），为PRV疫苗研发提供安全高效佐剂方案。

　　

伪狂犬病（Pseudorabies, PR）是由伪狂犬病病毒（PRV）引起的严重传染病，主要感染猪群并造成巨大经济损失。尽管疫苗接种是预防PRV的主要手段，但传统灭活疫苗存在免疫原性差、保护效果有限的问题。当前铝佐剂和矿物油佐剂因毒性、局部刺激等缺陷应用受限，而含角鲨烯的水包油(O/W)乳剂又面临成本高、来源受限的困境。如何开发安全高效的新型佐剂成为PRV疫苗研发的关键突破口。

江苏省农业科学院的研究团队创新性地以维生素E为油相，联合1,3-丙二醇二癸酸酯和Tween-80，开发出新型水包油纳米乳佐剂OEBB。该佐剂与灭活PRV（10⁷ TCID₅₀/20 μL）混合后形成粒径194.01±59.54 nm的纳米疫苗，在4-37°C下可稳定保存28天。动物实验显示，OEBB/PRV疫苗使仔猪中和抗体水平显著提升，攻毒保护率达80%，优于商用佐剂ISA201（70%）。机制研究表明，OEBB能激活注射部位抗原呈递细胞，促进PRV抗原向淋巴结递送，增加CD3⁺ T细胞并诱导CD4⁺和CD8⁺亚群分化，从而协同激活体液和细胞免疫。

研究采用纳米乳制备技术、动态光散射粒径分析、流式细胞术检测免疫细胞亚群等技术方法，通过小鼠和仔猪模型评估免疫效果，并利用组织病理学分析佐剂安全性。

主要研究结果

1. OEBB/PRV纳米疫苗的制备与表征：通过简单混合法制备的纳米疫苗呈现典型O/W结构，透射电镜显示均匀球形颗粒，在PBS和血清中均保持良好稳定性。
2. 免疫效果评估：OEBB佐剂组小鼠IgG抗体滴度较PRV单独组提高4倍，仔猪中和抗体水平与ISA201相当，但攻毒保护率显著更高（80% vs 70%）。
3. 安全性验证：溶血实验和组织病理学证实OEBB无溶血性、器官毒性，注射部位仅出现可逆性轻微炎症反应。
4. 作用机制解析：OEBB促进树突细胞(DCs)成熟和抗原摄取，增加引流淋巴结中CD11c⁺细胞数量，并通过IL-6/IL-12细胞因子通路激活T细胞免疫应答。

该研究首次将维生素E基纳米乳佐剂应用于PRV灭活疫苗，解决了传统佐剂安全性与效价的矛盾。OEBB的规模化生产成本仅为角鲨烯佐剂的1/5，且制备工艺简单，为动物疫苗佐剂研发提供了新思路。论文发表于《Virology》，为PRV防控及新型佐剂设计提供了重要理论依据和实践方案。