摘要: 肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)是仅次于肝癌的第二大原发性肝癌,近年来发病率逐年上升,但目前并无有效治疗药物。槲芪散(Hu Qi San,HQS)是全国名老中医钱英教授在临床实践多年的经验方剂,对慢性病毒性肝炎和原发性肝癌临床疗效确切,但是HQS在ICC上的基础研究目前仍是空白。基于此,本研究选用具有典型ICC样病变的sgp19-KRas小鼠肝原位ICC模型和QBC-939细胞模型,在体内外评估了HQS对ICC的治疗效果(本实验所有动物实验均获得首都医科大学实验动物伦理委员会批准,伦理审查编号为AEEI-2023-138)。首先,通过结晶紫染色实验和EdU实验检测发现HQS能够抑制QBC-939细胞的增殖与迁移(
P <0.05)。同时,本研究对sgp19-KRas小鼠模型进行了为期3周的每日20 g·kg
-1 HQS灌胃给药治疗,结果显示HQS可以有效抑制sgp19-KRas小鼠体内ICC的生长与肿瘤细胞增殖,提高小鼠的生存率。机制上,本研究通过网络药理学预测发现有303个HQS的活性成分对应的靶点与ICC疾病靶点相重合,并且这些重合的靶点在Hippo通路显著富集。分子对接结果预测HQS中芒柄花苷、毛异黄酮、没食子酸和二氢槲皮素可以与Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)直接结合,并且实验验证发现这4种成分对QBC-939细胞存在体外抑制作用。最后,对sgp19-KRas小鼠给药后肝组织及QBC-939细胞进行q-PCR和免疫蛋白印迹检测证实,HQS可抑制Hippo通路下游蛋白YAP的转录,下调YAP的表达,并抑制YAP下游基因的转录,特别是YAP-Notch通路的活性。综上,本研究发现HQS对ICC有潜在治疗作用,并且其作用机制与YAP-Notch通路密切相关。
