摘要: 肠道屏障作为机体与外界环境接触的主要界面,在脓毒症中扮演着至关重要的角色。亚甲蓝因其抗炎、抗氧化和改善微循环等多重药理作用,被广泛运用于脓毒症的治疗中,但其是否能改善脓毒症下肠道的屏障功能及其机制尚未知。本研究通过腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)构建脓毒症小鼠模型,经HE染色、ELISA和RT-PCR等方法观察了亚甲蓝(5～20 mg·kg
-1)对脓毒症小鼠炎症改善情况,经Evans染色、免疫荧光、RT-PCR分析了小鼠空肠和结肠组织屏障功能的变化。此外,进一步在巨噬细胞RAW264.7和肠上皮细胞Caco-2中分别评价了亚甲蓝(40 μg·mL
-1)对LPS刺激下NF-
κB和RhoA/ROCK信号通路的影响。本实验获得西南大学动物伦理委员会批准(批准号:IACUC-20241125-04)。研究结果显示,亚甲蓝(5～20 mg·kg
-1)可显著抑制脓毒症小鼠血浆和肠道组织中的炎症因子水平,上调空肠和结肠组织的紧密连接蛋白表达。体外实验证实,亚甲蓝(40 μg·mL
-1)可抑制LPS导致的RAW264.7细胞炎症因子分泌增加,其机制与抑制NF-
κB通路有关。亚甲蓝(40 μg·mL
-1)还可逆转LPS导致的Caco-2细胞跨膜电阻降低、细胞迁移率下降,其机制与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。综上,本研究证实亚甲蓝可通过抑制NF-
κB通路改善肠道炎症,还可经RhoA/ROCK信号通路改善肠道屏障功能,最终减缓脓毒症的发生发展。
