靶向ARfl/ARv7新型小分子降解剂LS-13抑制前列腺癌恩杂鲁胺耐药的药效及机制研究

　　

摘要: 恩杂鲁胺耐药(enzalutamide resistance,ENZR)是去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)最为常见的问题,患者在使用第二代雄激素受体(androgen receptor,AR)抑制剂恩杂鲁胺(enzalutamide,ENZ)治疗一段时间后,出现对ENZ的抵抗,严重威胁男性健康。但临床尚无治疗前列腺癌ENZ耐药的有效药物。前期基于对恩杂鲁胺的结构优化与改造,并通过细胞活力实验、克隆形成、细胞凋亡检测及蛋白质印迹等分子生物学手段检测发现:LS-13对前列腺癌LNCaP-ENZR和22RV1细胞的半数抑制浓度值分别为17.09和19.90μmol·L^-1。随后,通过使用0.1、1、5、10 μmol·L^-1 LS-13处理耐药细胞株12天后,观察结果显示LS-13能够以剂量依赖性方式抑制LNCaP-ENZR和22RV1细胞的体外克隆形成。此外,经过1.25、2.5、5、10 μmol·L^-1 LS-13处理耐药细胞株72 h后,流式细胞术的结果也显示LS-13能够以剂量依赖性方式促进耐药细胞株的凋亡。进一步地,在上述相同浓度条件下,LS-13处理22RV1细胞24 h后,发现其迁移速度显著减缓(P <0.05)。这些结果共同表明,小分子化合物LS-13具有明显抑制ENZR的作用。进一步机制探讨发现,LS-13可通过靶向ARfl/ARv7并促进其蛋白降解,抑制AR对下游靶基因的转录水平,进而抑制ENZR细胞增殖,促进细胞凋亡。该研究为靶向ARfl/ARv7降解,克服ENZ耐药提供候选化合物。