用于伤口愈合的蹄甲多肽有效组分筛选及温敏凝胶制备研究

　　

摘要: 副产品猪蹄甲在中医药理论中,“辟一切恶疮”,具有止血、凝血和抗炎等药理作用,提示对皮肤创伤可能有积极作用。本研究通过酶解法从猪蹄甲中酶解出不同分子质量的蹄甲多肽(hoof nails peptides,HNPs),采用创面愈合试验从低于10 kDa (HNP I)、3～10 kDa (HNP II)和高于10 kDa (HNP III)3个分子质量HNPs中筛选出具有较强促进成纤维细胞增殖和胶原蛋白修复能力的组分,通过创面愈合率、H&E和Masson染色评估创面愈合形态及胶原沉积情况,ELISA检测转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和内皮血管生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平,并将最佳组分制备成能适应不规则伤口的温敏凝胶,评估该凝胶流变学特性、相变温度及内部结构。结果发现HNP II组分伤口愈合率较空白基质组显著提高(P<0.05),组织中生长因子TGF-β1、VEGF表达水平显著提高(P<0.05);将对创面修复能力最强的HNP II组分制备的温敏凝胶具有良好的生物相容性,为蹄甲多肽制剂的开发和应用提供试验支持。动物实验经西南大学实验动物伦理委员会批准,且实验均按相关指导原则和规定进行,批准号:IACUC-20231218-01。