-
生物通官微
陪你抓住生命科技
跳动的脉搏
分不清免疫细胞?CD45来帮你!
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年06月23日 来源:基因有限公司
编辑推荐:
下次当你面对纷繁复杂的流式细胞图感到眼花缭乱时,记住:先找CD45!
显微镜下的血液样本,宛如一场盛大的“细胞化装舞会”。淋巴细胞、单核细胞、粒细胞……它们形态各异,功能不同,熙熙攘攘。如何在这密密麻麻的“舞池”中,快速、准确地识别出每一位“免疫卫士”的真面目?
别担心!当流式细胞术这位“高科技侦探”登场时,它有一位不可或缺的“关键裁判”——CD45! 它就像是白细胞统一佩戴的“专属工作证”或“身份证”,是它们宣告“我属于免疫大家族”的核心标志!(而红细胞、血小板、有核红细胞、成纤维细胞等通常“无证”或“证件模糊”,不表达或弱表达CD45)。不仅如此,CD45在T细胞、B细胞活化等关键免疫信号传导中也扮演着重要角色,是细胞功能调控的幕后功臣之一。
CD45的核心使命:流式世界的“圈门之王”
CD45在流式细胞术中的价值,堪称“基石中的基石”,核心就体现在神奇的“圈门”(Gating)技术上。这是精准分析细胞亚群的关键一步!
1、精准锁定目标:圈出所有白细胞!
有了CD45这把“金钥匙”,我们就能在复杂的细胞图谱中,精准地‘圈出’所有真正的白细胞 (CD45+)!这一步如同在茫茫人海中,给所有免疫细胞成员佩戴上醒目的荧光徽章。
2、层层深入,细分亚群:
圈出CD45+这个大群体只是开始!紧接着,我们可以结合细胞的大小 (前向散射光 FSC) 和内部复杂度/颗粒度 (侧向散射光 SSC) 进行关键的第二层分选:
淋巴细胞 (Lymphocytes): CD45+ (通常高亮表达), SSC低 (内部简单), FSC小 (个头小)。
单核细胞 (Monocytes): CD45+, SSC中等, FSC较大。
粒细胞 (Granulocytes): CD45+ (表达强度可能稍弱于淋巴), SSC高 (内部颗粒多)。
以GENE4Abio 新开发的荧光抗体CD45-BZY500、CD45-BZY515 为例来展示
奠定精细分析的基础
成功划分了主要亚群的大门后,我们才能在这些门内使用其他特异性标志物进行更精细的分析:
在淋巴细胞门内:分析 CD3 (T细胞), CD19 (B细胞), CD4/CD8 (T亚群), CD56 (NK细胞) 等。
在单核细胞门内:分析 CD14, CD16 等亚群。
没有CD45这第一道精准的“大门”,后续所有的精细分析都如同无源之水、无本之木。
用好CD45:实用技巧与避坑指南
工欲善其事,必先利其器。掌握CD45,这些要点需牢记:
抗体选择是根本
选择经过充分验证、适用于流式的抗CD45抗体。常用且可靠的克隆号包括 HI30, 2D1, 30-F11 等。
根据你的多色Panel设计,为其匹配合适的荧光染料(抗原表达水平:低表达抗原应选择强荧光染料,如PE、APC、BV421等;高表达抗原可选择相对较弱的荧光染料如FITC、PE-CY5、APC-CY7等),确保其信号明亮易辨。
样本质量是关键
样本新鲜度直接影响细胞活力和抗原表达。
处理流程至关重要:特别是裂解红细胞是否彻底?残留的红细胞碎片会严重干扰CD45+白细胞的圈门和后续分析。死细胞过多也会影响结果。
固定、破膜等步骤(如需做胞内染色)也需优化,避免破坏CD45表位或增加非特异性染色。
所以,下次当你面对纷繁复杂的流式细胞图感到眼花缭乱时,记住:先找CD45!
它不仅是白细胞的“身份证”,更是流式分析中打开免疫细胞世界大门的第一把、也是最重要的一把“万能钥匙”。精准地圈定CD45+白细胞群体,是排除干扰、获得可靠数据的基石,也是后续一切精细分析的起点。掌握了CD45,你就掌握了流式细胞术的核心逻辑之一!
今天小编就为大家梳理了国产流抗“扛把子”——基因四正柏(简称:GENE4Abio)所拥有的CD45靶标:
欲了更多详情,请扫码添加您的专属技术顾问咨询,基因有限公司将以专业与热忱,为您提供最优质的服务!