温胆汤通过调控肠道菌群与色氨酸代谢改善失眠的机制研究

失眠作为威胁公众健康的全球性问题，传统中药温胆汤(WDD)展现出显著疗效但机制不明。本研究整合多组学技术(16S rRNA测序、非靶向代谢组学)和网络药理学，首次揭示WDD通过重塑肠道菌群(GM)平衡、调控色氨酸代谢通路(IDO1/KMO)、修复肠脑屏障(occludin/Claudin-1/ZO-1)及降低促炎因子(IL-6/TNF-α)，最终改善睡眠的微生物-肠-脑轴(MGBA)机制，为中药现代化研究提供新范式。

　　

睡眠是人类健康的基石，但全球约30%人群正遭受失眠困扰。现代医学主要依赖苯二氮?类药物，但伴随耐药性和依赖性风险。传统中药温胆汤(WDD)源自唐代《备急千金要方》，临床证实对失眠有效，但其科学机制始终成谜。近年研究发现，肠道菌群(GM)作为"第二基因组"，通过微生物-肠-脑轴(MGBA)调控睡眠，而色氨酸代谢异常与神经炎症密切相关，这为揭示WDD作用机制提供了新视角。

陕西中医药大学的研究团队在《Phytomedicine》发表研究，采用超高效液相色谱-质谱(UHPLC-Orbitrap Exploris/MS)解析WDD含110种活性成分如橙皮苷、甘草酸。通过PCPA诱导失眠大鼠模型，结合行为学测试、ELISA、免疫荧光等技术，发现WDD显著缩短入睡潜伏期、延长睡眠时长。研究创新性整合16S rRNA测序、非靶向代谢组学和网络药理学，并采用抗生素清除菌群和粪菌移植(FMT)实验，系统阐明WDD通过GM-MGBA通路改善失眠的机制。

【化学组分分析】
UHPLC-MS/MS鉴定WDD含110种成分，包括橙皮素(tangeretin)、辛弗林(synephrine)等，为后续机制研究奠定物质基础。

【行为学改善】
WDD治疗组较模型组睡眠潜伏期缩短42%，睡眠时长增加58%，并显著缓解焦虑样行为。ELISA显示WDD调节5-HT、GABA等神经递质水平，Western blot证实其提升海马区紧密连接蛋白(Occludin/Claudin-1/ZO-1)表达。

【抗炎与屏障修复】
WDD使结肠和海马中促炎因子IL-6、TNF-α降低50%以上，抗炎因子IL-10提升2.3倍。免疫组化显示肠屏障完整性恢复，Iba-1⁺小胶质细胞减少61%，提示神经炎症缓解。

【菌群-代谢调控】
16S rRNA测序发现WDD增加益生菌(如乳杆菌)丰度，降低条件致病菌。非靶向代谢组学揭示色氨酸代谢通路异常，FMT实验证实WDD通过GM调节粪便和血清中色氨酸代谢物(KYN/5-HT比例下降38%)。

【分子机制】
RT-qPCR和Western blot显示WDD抑制IDO1(吲哚胺2,3-双加氧酶)和KMO(犬尿氨酸单加氧酶)表达，纠正色氨酸代谢的犬尿氨酸通路异常，最终恢复神经递质平衡。

该研究首次系统阐释WDD通过"多成分-多靶点"网络调控GM-MGBA轴改善失眠的机制：①重塑GM生态，增加有益菌定植；②抑制IDO1/KMO，减少神经毒性代谢物积累；③修复肠屏障和血脑屏障(BBB)，阻断外周炎症向中枢传递；④调节5-HT/GABA能系统。这不仅为WDD临床应用提供科学依据，更开创性地将中药复方研究与微生物组学、代谢组学交叉融合，为其他中药作用机制研究提供方法论参考。研究揭示的GM-IDO1-色氨酸代谢轴，可能成为睡眠障碍干预的新靶点，具有重要转化医学价值。