空间转录组学揭示宿主对口腔念珠菌病的免疫应答图谱：M2巨噬细胞与新型抗菌蛋白SPRR的关键作用

本研究采用10× Visium空间转录组技术，首次绘制了免疫健全小鼠口腔念珠菌病（OPC）的宿主应答时空图谱。研究发现：1）感染微环境中M2型巨噬细胞（CD206+/MRC1+）通过IL-4Rα/IL-13Rα1信号通路抑制过度炎症；2）血小板活化（PF4/SELP）和角质细胞源性小脯氨酸富集抗菌蛋白（SPRR）构成新型防御屏障；3）代谢重编程（HIF-1α介导的糖酵解→β氧化）驱动感染区（INF）向修复区（RES）转化。该研究为免疫抑制患者OPC治疗提供了M2极化调节和SPRR蛋白疗法新思路。

　　

空间转录组解析OPC免疫微环境
10× Visium技术对BALB/c小鼠感染60小时后的舌组织进行空间转录组分析，发现感染灶（INF）与修复区（RES）存在显著差异：INF区域高表达IL-17A/IL-1β等促炎因子（>60倍）和糖酵解相关基因（HIF-1α⁺），而RES区域富集M2巨噬细胞标记物（MRC1⁺/ARG1⁺）和β氧化酶系。CellChat分析揭示成纤维细胞通过胶原蛋白（COL1A1）和层粘连蛋白（LUM）信号调控上皮修复，其通讯强度在感染组提升378%。

免疫平衡的双向调控
NF-κB抑制因子（NFKBIA/NFKBIE）的表达量是NF-κB本身的2倍，形成"刹车"机制。RP-832C抑制M2巨噬细胞可使真菌载量延长1 log（P<0.01），证实M2通过分泌CCL6/CCL8促进组织修复。值得注意的是，虽然Th2细胞因子（IL-4/IL-13）未检出，但其受体（IL-4Rα/IL-13Rα1）在520个捕获点广泛分布，提示早期免疫转换。

SPRR蛋白的抗菌突破
小脯氨酸富集蛋白家族（SPRR1/2）表达量暴增300倍，与钙卫蛋白（S100A8/A9）共定位。重组SPRR2e在0.5 μg/mL即可破坏白色念珠菌膜完整性（FDA渗透性实验），对生物膜抑制浓度（MBIC₅₀）为32 μg/mL。基因敲除（Sprr1a^?/?;Sprr2a^?/?）小鼠感染后真菌载量较野生型高1 log（P<0.0001），口服SPRR2e治疗使免疫抑制小鼠真菌载量降低1.5 log。

代谢与癌化风险警示
INF区域胆固醇合成通路（HMGCR⁺）与TSCC相关基因（FOSL/JUNB）同步激活，而RES区域胰岛素样生长因子（IGF）信号促进胶原重塑。这种"伤口未愈"状态（IL-6/JAK2/STAT3轴持续活化）可能解释OPC患者口腔鳞癌（OSCC）风险升高现象。

技术局限与转化价值
空间转录组分辨率限制（每个55 μm斑点含多个细胞）可能低估单细胞异质性。但该技术首次可视化SPRR蛋白在角质层的杀菌作用，为开发穿透黏膜的抗菌肽提供新靶点。M2巨噬细胞时序调控和血小板-巨核细胞轴（CD41⁺PF4⁺）的发现，为免疫调节疗法设计开辟新途径。