早期生长菌株在自动与手动肉汤微量稀释抗菌药敏测试中的性能评估：缩短周转时间的创新策略

这篇研究通过对比6小时早期生长菌株(egAST)与18-24小时标准生长菌株(sgAST)在BD Phoenix自动化系统和Sensititre肉汤微量稀释(BMD)中的表现，证实egAST可将药敏测试(TAT)缩短18小时且保持高一致性（CA>90%）。关键发现包括：Enterobacterales在Phoenix系统中仅出现1.1%极重大误差(VME)，而Staphylococcus spp.在Sensititre中氯霉素和红霉素误差率较高。该研究为无需额外成本的快速AST方案提供了循证依据，对优化抗生素管理(ASP)具有重要临床意义。

　　

ABSTRACT

传统抗菌药敏测试(AST)从菌株分离到结果需数日，其中18-24小时孵育期是主要瓶颈。本研究创新性评估6小时早期生长菌株(egAST)在BD Phoenix自动化系统和Thermo Fisher Sensititre肉汤微量稀释(BMD)中的表现，与标准18-24小时生长菌株(sgAST)对比显示：在1,666组菌株-药物组合中，Enterobacterales通过Phoenix测试的极重大误差(VME)仅0.17%，而Pseudomonas aeruginosa未出现重大误差(ME)。这一突破性发现为临床实验室缩短AST周转时间(TAT)提供了可行方案。

INTRODUCTION

AST是细菌感染诊疗的核心环节，但现行CLSI指南推荐的18-24小时孵育期缺乏数据支撑。随着微生物实验室全天候检测的普及，快速AST方法成为刚需。既往研究多聚焦早期生长菌株的纸片扩散法(DD)，而BMD和自动化系统的性能尚属空白。本研究首次系统评估egAST在两种主流商业系统中的表现，填补了该领域知识缺口。

MATERIALS AND METHODS

研究分两阶段：第一阶段采用7株质控菌株(5株革兰阴性菌如Escherichia coli ATCC 25922，2株革兰阳性菌如Staphylococcus aureus ATCC 29213)验证可行性；第二阶段纳入142例临床分离株，涵盖Enterobacterales、P. aeruginosa和葡萄球菌等。通过四区划线法接种血琼脂平板，分别在6小时和24小时制备0.5麦氏浊度菌悬液进行测试。

关键指标包括：基本一致性(EA，MIC值相差≤1个稀释度)、分类一致性(CA，药敏结果S/I/R一致)以及三类误差——微小误差(MiE)、重大误差(ME)和极重大误差(VME)。

RESULTS

早期生长可行性
91.6%的菌株在6小时孵育后即可达到测试要求，但Proteus spp.和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)生长较慢。图1直观展示6小时与24小时菌落形态差异：Enterococcus faecalis在6小时已形成针尖状菌落，而P. aeruginosa需更长时间形成典型菌落。

Phoenix系统表现
1,408组Enterobacterales数据中，EA达97.5%，CA达98.4%。值得注意的是ceftazidime出现20% VME（1/5），而piperacillin-tazobactam的ME仅1.6%。对于P. aeruginosa，110组数据显示98.2% CA且无VME。葡萄球菌和肠球菌在Phoenix中表现完美，CA和EA均为100%。

Sensititre系统表现
革兰阴性菌中，Enterobacterales的CA达98.6%且无VME，但P. aeruginosa对doripenem出现30% ME。革兰阳性菌中，Staphylococcus spp.的氯霉素EA降至81.8%，且clindamycin出现25% VME；Enterococcus spp.的erythromycin误差率高达35.3%。

DISCUSSION

该研究揭示了egAST在不同测试系统中的差异化表现：自动化系统对革兰阴性菌更可靠，而BMD对某些革兰阳性菌存在局限。特别值得关注的是，碳青霉烯类(如doripenem)和β-内酰胺酶抑制剂组合(如ticarcillin-clavulanate)在早期生长菌株中误差率升高，可能与细菌代谢活性差异相关。

与既往DD研究相比，本研究发现自动化系统更适合egAST，其通过氧化还原反应和浊度检测的双重机制可能弥补早期菌株生长不均的影响。而依赖肉眼判读的BMD在检测缓慢生长的耐药株(如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA)时灵敏度下降。

临床转化价值

实施egAST可使AST流程压缩至单班次完成，对儿童医院等需要快速精准用药的场景尤为重要。未来需针对特定菌药组合制定误差补偿方案，并通过多中心研究验证普适性。这项"零成本"创新为抗生素管理计划(ASP)提供了新工具，有望减少广谱抗生素暴露和住院天数。