阿根廷科尔多瓦即食绿叶蔬菜与浆果中肠道食源性病毒的检测与基因分型研究

针对即食(RTE)绿叶蔬菜和浆果可能携带肠道病毒的风险，研究人员对阿根廷科尔多瓦市售的242份样本进行检测，发现4.2%浆果(主要为冷冻草莓)携带诺如病毒(NoV)或轮状病毒(RV)，10.3%绿叶菜携带NoV、RV和腺病毒(AdV)。研究揭示了本地流行毒株与食源性病毒的基因关联，为完善食品安全监管提供关键数据。

　　

随着城市化进程加速和饮食结构变化，即食食品(RTE)因其便利性受到全球消费者青睐。然而，新鲜果蔬在种植、采收和加工环节可能通过粪-口途径污染肠道病毒，这些非包膜病毒(non-enveloped viruses)对常规消毒措施具有较强抵抗力。阿根廷作为农业大国，年产超5.8万吨浆果，但现行法规仅针对细菌检测，忽视了对诺如病毒(norovirus, NoV)、甲型肝炎病毒(hepatitis A virus, HAV)等高危病原体的监控。科尔多瓦国立大学的研究团队在《Food Research International》发表的研究，首次系统评估了阿根廷中部市售浆果和绿叶蔬菜的病毒污染状况。

研究采用ISO 15216-2:2019标准，通过qPCR/RT-qPCR对242份样本（145份浆果、97份绿叶菜）进行五种病毒筛查，阳性样本进一步通过Sanger测序和系统发育分析鉴定毒株。结果显示：冷冻草莓中NoV GI和RV检出率达4.9%，新鲜草莓RV阳性率2.3%；绿叶菜中NoV、RV和AdV混合污染现象显著（10.3%）。基因分析发现，这些毒株与当地胃肠炎暴发流行株高度同源，证实了食物链在病毒传播中的关键作用。值得注意的是，HAV和HEV未检出，提示其通过此类食品传播的风险较低。

关键技术包括：1）基于ISO标准的病毒富集与核酸提取；2）多重qPCR/RT-qPCR检测体系；3）型别特异性RT-PCR与Sanger测序；4）系统发育树构建。样本来源于科尔多瓦零售市场，涵盖主要产地图库曼省和潘帕斯地区的草莓、蓝莓及多种绿叶蔬菜。

【病毒检测结果】
冷冻草莓中NoV GI（基因型I）和RV阳性率分别为2.9%和2.0%，显著高于新鲜样品。基因分型显示RV毒株属G3P[8]型，与当地儿童腹泻病例基因序列相似度达98%。

【绿叶菜污染特征】
10份阳性样本中，NoV GII.4（悉尼变异株）占比最高（60%），该型别是全球胃肠炎暴发的主要致病原。AdV检出株经测序确认为F组41型，与水源性传播毒株高度同源。

【系统发育分析】
构建的VP1基因进化树显示，食物源性NoV毒株与2019-2022年阿根廷社区暴发株处于相同进化分支，支持"食物-人"传播链的流行病学关联。

研究结论强调，尽管HAV/HEV风险较低，但NoV和RV在RTE食品中的流行率值得警惕。特别是冷冻草莓加工环节可能放大污染风险，因其冷冻工艺无法有效灭活病毒。该成果为阿根廷制定首个食品病毒监测标准提供了科学依据，建议将NoV检测纳入GAP（良好农业规范）关键控制点。作者团队指出，当前依赖粪便大肠菌群作为病毒替代指标的做法存在局限性，亟需建立直接的病毒监测体系。这项研究填补了拉丁美洲食源性病毒数据库的空白，对保障全球食品贸易安全具有示范意义。