番茄冷胁迫响应中茉莉酸信号调控机制解析：MYB15-LOXD与MYB15-MYC2-LOXD模块的动态互作

（编辑推荐）本研究揭示了番茄应对冷胁迫的核心调控网络：转录因子SlMYB15通过动态调控SlLOXD（JA合成关键酶）和SlMYC2（JA信号枢纽），形成ABA-JA信号转换机制。SlMYB15在冷胁迫早期（6 h）激活SlLOXD表达并抑制SlMYC2，24 h后通过miR156e-3p介导的SlMYB15降解解除抑制，SlMYC2接力激活SlLOXD-SlCBF1/2通路，为作物抗寒育种提供新靶点。

　　

（小标题）ABA与JA在冷胁迫中的时序响应
番茄叶片在4°C处理下呈现ABA与JA的差异积累模式。ABA含量在6 h达到峰值（4.28倍），而JA在24 h才出现最高积累（3.47倍）。这种时序特征暗示植物存在从ABA主导的快速响应到JA持续调控的防御策略转换。

（小标题）SlLOXD-JA模块的冷耐受功能
SlLOXD作为定位于叶绿体的脂氧合酶（13-LOXs家族），其表达在冷处理24 h的叶片中显著上调。基因编辑突变体loxd-6/7表现出JA含量降低和Fv/Fm值下降（0.45 vs WT 0.72），而过表达株系LOXDOE-14/16的电解质渗漏率降低23%，证实SlLOXD通过调控JA生物合成增强冷耐受性。

（小标题）SlMYC2的双重调控机制
SlMYC2作为JA信号核心转录因子，直接结合SlCBF1/2启动子的G-box元件（CACGTG）。EMSA实验显示MBP-SlMYC2蛋白与SlCBF1/2探针特异性结合，竞争实验中100倍未标记探针可完全消除迁移带。slmyc2-13突变体在7天冷胁迫后出现严重萎蔫，Fv/Fm值降低42%，证实其通过激活CBF通路维持低温适应性。

（小标题）SlMYB15的时空调控网络
ChIP-qPCR揭示SlMYB15-HA蛋白在体内同时结合SlLOXD启动子的TAACAA元件（富集度5.8倍）和SlMYC2启动子的TAGTTA元件。双荧光素酶报告系统显示：SlMYB15对SlLOXD的激活强度（LUC/REN=4.1）弱于SlMYC2（LUC/REN=6.3），但对SlMYC2启动子表现出1.7倍抑制效应，形成"先促进后抑制"的精准调控。

（小标题）microRNA介导的信号转换
冷处理6 h后，sly-miR156e-3p的表达上调导致SlMYB15转录本降解。在myb15-14突变体中，SlMYC2表达量反弹至WT的2.3倍，驱动SlLOXD持续激活。TRV2:SlMYB15+SlMYC2共沉默植株的GUS活性较单沉默下降68%，验证了SlMYC2在后期信号维持中的主导作用。

（小标题）分子模块的农艺应用价值
该研究解析了SlMYB15-SlLOXD-SlMYC2-SlCBF1/2级联反应的动态平衡机制，首次发现：1）MYB家族成员可同时正调JA合成酶和负调JA信号因子；2）时间依赖性的激素信号交接模式；3）miRNA介导的转录因子降解是信号转换的关键节点，为设计阶段特异性抗冷基因工程策略奠定基础。