大口黑鲈氨氮与亚硝酸盐氮急性暴露的毒性效应及恢复机制研究

本研究探讨了氨氮（ammonia-N）和亚硝酸盐氮（nitrite-N）急性暴露对大口黑鲈（Micropterus salmoides）的毒性影响，包括超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、酸性磷酸酶（ACP）和碱性磷酸酶（AKP）活性的动态变化、肝鳃组织损伤以及肠道微生物群紊乱，并系统评估了暴露后恢复期的生理修复效果。研究揭示了高浓度污染物引发的氧化应激和组织病理学变化，为水产养殖水质管理和鱼类健康保护提供关键科学依据。

　　

1 引言
大口黑鲈（Micropterus salmoides）原产于北美，因其适应性强、生长快、肉质鲜美且无肌间刺，已成为中国主要淡水养殖物种。据2023年中国渔业统计年鉴，其产量在2022年已超过80万吨。然而，在高密度集约化养殖中，氨氮（ammonia-N）和亚硝酸盐氮（nitrite-N）作为常见污染物，易引发鱼类氧化应激，影响生长、生理功能和存活。氨氮可抑制鱼类代谢，导致组织损伤；亚硝酸盐氮则通过干扰氧运输系统造成窒息风险。既往研究聚焦单一效应（如缺氧或酶活性变化），但缺乏对暴露后恢复机制的系统探讨。本研究旨在通过毒性实验，全面评估氨氮和亚硝酸盐氮对大口黑鲈的急性影响及恢复效果，为实际养殖管理提供指导。

2 材料与方法
实验在浙江淡水渔业研究所（中国湖州）进行，选用平均体重502.79_±42.99 g的健康大口黑鲈540尾。实验容器为100 L聚丙烯养殖桶，水温25^°C_±1^°C，pH 7.5–8.0，溶解氧≥7 mg/L。预实验通过线性插值法测定96 h半致死浓度（LC₅₀），设置五组：Group 1（对照组，0 mg/L ammonia-N）、Group 2（氨氮应激组，50 mg/L ammonia-N）、Group 3（氨氮恢复组，96 h应激后换清水恢复96 h）、Group 4（亚硝酸盐氮应激组，45 mg/L nitrite-N）和Group 5（亚硝酸盐氮恢复组，96 h应激后换清水恢复96 h）。每组三平行，每桶12尾鱼。分别在96 h和192 h取样，麻醉后解剖取肝、肠和鳃组织。肝组织用于测定SOD、MDA、ACP和AKP活性（试剂盒法）；肝鳃组织固定后切片（H&E染色）；肠道内容物用于微生物DNA提取（Illumina PE250测序，分析OTU聚类和多样性指数）。数据以均值_±标准差表示，SPSS 17.0软件进行ANOVA和Tukey检验（p<0.05为显著）。

3 结果
3.1 大口黑鲈对氨氮和亚硝酸盐氮的急性毒性
预实验显示，5