大口黑鲈蛙病毒快速检测技术：基础重组酶聚合酶扩增(basic-RPA)与侧流层析试纸条(RPA-LFD)联用方法的建立

为解决大口黑鲈蛙病毒(LMBRaV)高致死率难题，研究人员开发了基于病毒mcp基因的基础重组酶扩增(basic-RPA)和侧流层析试纸条(RPA-LFD)检测技术。两种方法可在38°C/25分钟和45°C/15分钟内完成检测，灵敏度达1拷贝/μL，比常规PCR多检出9份临床样本，为水产病毒现场诊断提供高效解决方案。

　　

大口黑鲈(Microterus salmoides)养殖业正面临蛙病毒(LMBRaV)引发的高死亡率威胁。为阻断病毒传播链，研究者创新性地建立了两种快速检测技术：基础重组酶聚合酶扩增(basic-RPA)和结合侧流层析试纸条的RPA-LFD检测体系。

研究团队以病毒主要衣壳蛋白(mcp)基因为靶标设计引物，通过优化反应条件，使basic-RPA在38°C恒温25分钟即可通过电泳判读结果，而RPA-LFD更将检测时间压缩至15分钟(45°C)，肉眼即可读取试纸条结果。两种方法均展现出卓越的特异性，对鲤疱疹病毒2型(CyHV-2)、传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)等常见水产病原体均无交叉反应。

令人瞩目的是，其检测下限达到1拷贝/μL的分子灵敏度，在临床样本检测中比传统PCR多检出9份阳性样本。这种无需复杂仪器的检测方案，为养殖场提供了堪比实验室精度的现场诊断工具，犹如为水产疫病防控装上了"分子雷达"。