LCMS法定量检测米拉贝隆原料药中基因毒性杂质(4-NPE RC-2)的开发与验证

为解决米拉贝隆原料药中潜在基因毒性杂质(PGI) 2-(2-硝基苯基)乙胺盐酸盐(4-NPE RC-2)的检测难题，研究人员开发了基于液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)的高灵敏度分析方法。该方法采用Inertsil ODS 3-V色谱柱和梯度洗脱模式，在MRM模式下实现9-45 ppm范围内的精准定量，线性相关系数>0.990，回收率达100.0%-103.0%，为符合ICH M7指南的基因毒性控制提供了可靠技术方案。

　　

米拉贝隆原料药中潜藏的基因毒性杂质(PGI)2-(2-硝基苯基)乙胺盐酸盐(4-NPE RC-2)引发安全担忧，研究人员为此构建了突破性的检测方案。鉴于该杂质具有发色团特性，常规高效液相色谱(HPLC)本可胜任，但样品基质干扰迫使团队转向更具选择性的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术。

实验采用反相Inertsil ODS 3-V色谱柱，以0.2%甲酸水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱，流速0.8 mL/min。通过电喷雾电离(ESI)源结合三重四极杆质谱的多反应监测(MRM)模式，成功实现超痕量检测。方法验证显示，在9-45 ppm(相当于每日最大剂量50 mg的30 ppm限值)范围内呈现优异线性，相关系数突破0.990大关。更令人振奋的是，回收率稳定在100.0%-103.0%之间，相对标准偏差(RSD)始终低于5.0%，完美满足ICH M7指南对毒理学关注阈值(TTC)1.5 mg/天的严苛要求。这项技术为原料药质量控制树立了新标杆，尤其适用于含复杂基质的药物分析。