NR1D2通过调控铁死亡和免疫浸润诱导卵巢癌化疗耐药性的机制研究

本研究针对卵巢癌化疗耐药性这一临床难题，揭示了核受体亚家族1组D成员2(NR1D2)通过调控铁死亡(Ferroptosis)抑制蛋白FSP1和肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)极化，促进化疗耐药的新机制。研究人员通过构建顺铂耐药细胞模型、代谢组学分析和免疫共培养实验，首次证实NR1D2高表达与患者不良预后显著相关，其沉默可增强顺铂敏感性并触发铁死亡（表现为MDA和Fe2+水平升高），同时通过促进M1型巨噬细胞极化增强PD-L1表达。该发现为卵巢癌联合治疗提供了新靶点，论文发表于《Discover Oncology》。

　　

卵巢癌作为致死率最高的妇科恶性肿瘤，其治疗面临的最大挑战是化疗耐药。尽管铂类药物是标准治疗方案，但多数患者最终产生耐药导致复发。近年来，铁死亡——一种铁依赖性脂质过氧化驱动的细胞死亡方式，被证实与肿瘤耐药密切相关。然而，调控这一过程的关键分子及其与肿瘤免疫微环境的交互机制尚不明确。

上海交通大学医学院附属新华医院的研究团队通过RNA测序发现，核受体NR1D2在顺铂耐药卵巢癌细胞中异常高表达。临床样本分析显示，NR1D2水平与患者较短的总生存期(OS)和进展后生存期(PPS)显著相关。机制研究表明，NR1D2通过上调铁死亡抑制蛋白FSP1（而非经典通路GPX4或DHODH），抑制脂质过氧化产物MDA和亚铁离子(Fe²⁺)积累，从而维持耐药细胞存活。更有趣的是，NR1D2沉默还通过促进M1型巨噬细胞(CD86⁺)极化并抑制M2型(CD206⁺)，增强PD-L1表达，提示其可能改善免疫治疗响应。这些发现为克服卵巢癌耐药提供了"铁死亡-免疫"双靶点干预策略。

研究采用的主要技术包括：1）梯度浓度法构建顺铂耐药细胞系SKOV3-CR；2）代谢组学分析铁死亡相关代谢物变化；3）免疫共培养实验评估巨噬细胞极化；4）裸鼠移植瘤模型验证体内疗效；5）TIMER2.0数据库分析免疫浸润特征。

3.1 NR1D2与卵巢癌化疗耐药正相关
通过RNA测序和qRT-PCR证实，NR1D2在耐药细胞中表达量是亲代细胞的3.2倍。沉默NR1D2使顺铂IC₅₀值降低67%，且对紫杉醇、阿霉素等药物同样增敏。

3.2 NR1D2高表达预示不良预后
组织微阵列显示，耐药组NR1D2 H-score较敏感组高2.1倍。Kaplan-Meier分析表明，高表达患者中位生存期缩短8.3个月。

3.3 NR1D2通过FSP1抑制铁死亡
STRING数据库筛选出NR1D2与生物钟基因CLOCK、PER2互作。Western blot显示NR1D2特异性下调FSP1（而非GPX4或GCH1），导致MDA水平升高4.8倍。

3.4 NR1D2沉默增强铁死亡标志物
代谢组学发现谷胱甘肽代谢通路显著富集。流式检测显示Fe²⁺浓度增加3.5倍，铁死亡诱导剂erastin可协同增强顺铂效果。

3.5 体内实验验证治疗效果
移植瘤模型证实，NR1D2沉默组肿瘤体积减少62%，且组织内MDA水平升高2.3倍。

3.6 NR1D2调控免疫浸润
TIMER2.0显示NR1D2与B细胞、CD8⁺T细胞正相关。共培养实验表明，NR1D2沉默使M1型巨噬细胞比例增加2.1倍，PD-L1表达上调。

该研究首次阐明NR1D2通过"FSP1-铁死亡"轴和巨噬细胞重编程双重机制促进化疗耐药。特别值得注意的是，NR1D2对FSP1的特异性调控不同于经典GPX4通路，这为开发精准靶向策略提供了依据。临床转化方面，联合NR1D2抑制剂与铁死亡诱导剂可能逆转耐药，而其对PD-L1的上调作用提示免疫治疗联合潜力。未来研究需进一步解析NR1D2转录调控FSP1的具体机制，并在人源化小鼠模型中验证免疫调节效果。这些发现不仅适用于卵巢癌，也为其他恶性肿瘤的耐药研究提供了新视角。