综述：蟾毒灵在癌症治疗中的细胞和分子机制：系统综述

这篇综述系统总结了蟾毒活性成分蟾毒灵（ARBU）的抗癌机制，涵盖细胞周期阻滞、凋亡（apoptosis）、自噬（autophagy）、上皮-间质转化（EMT）等关键通路，特别关注其对PI3K/Akt/mTOR、NF-κB、Nrf2等信号通路的调控作用，为天然产物抗癌药物开发提供了重要理论依据。

　　

引言

根据GLOBOCAN 2024数据，2022年全球新增癌症病例约2000万例，癌症相关死亡达970万例。癌症治疗面临化疗耐药、放疗抵抗等挑战，促使研究者转向天然产物开发。蟾毒灵（Arenobufagin, ARBU）是从中华大蟾蜍（Bufo gargarizans）毒液中提取的C-24甾体化合物，其α-吡喃酮环结构赋予其独特生物活性。

来源与代谢特性

ARBU目前无法化学合成，需通过高速逆流色谱（HSCCC）从蟾酥中分离纯化。体内代谢研究表明，ARBU口服生物利用度为0.55，主要经CYP3A4酶代谢，在肝、肾等组织分布显著。药代动力学显示其具有双峰特征，提示可能存在肠肝循环。

抗癌分子机制

细胞周期调控

ARBU通过多途径诱导G₂/M期阻滞：

• 激活ATM/ATR-Chk1/Chk2通路，下调CDC25C和Cyclin B1
• 在鼻咽癌（NPC）中上调p21，抑制CDK1-Cyclin B1复合物
• 通过抑制SRC-1和SRC-3调控E2F-1转录活性

细胞凋亡诱导

ARBU通过线粒体途径和死亡受体途径双重机制促凋亡：

• 上调促凋亡蛋白Noxa和Bax，抑制Mcl-1
• 激活JNK通路促进YAP/p73复合物形成
• 通过ROS积累导致线粒体膜电位崩溃
• 在HepG2细胞中使caspase-3活性升高3.5倍

转移与血管生成抑制

ARBU显著抑制肿瘤转移关键步骤：

• 靶向c-MYC/Nrf2轴，降低MMP2/9表达
• 通过IKKβ/NF-κB通路抑制EMT进程
• 阻断VEGFR-2介导的血管生成信号

铁死亡与自噬调控

ARBU诱导铁死亡的独特机制：

• 上调Rev-erbα和Tfrc，抑制GPX4和FSP1
• 通过p62-Keap1-Nrf2通路诱导自噬依赖性铁死亡
• 在胰腺癌中使LC3-II水平增加4.2倍

联合治疗策略

ARBU展现显著协同效应：

• 与顺铂（CDDP）联用通过碱死亡（alkaliptosis）增强疗效
• 使吉西他滨对胰腺癌细胞的IC₅₀降低57%
• 增强三苯氧胺对HER2阳性乳腺癌的抑制作用

纳米递送系统

新型给药系统突破ARBU应用瓶颈：

• PEG-PLA纳米粒使肿瘤抑制率提升1.28倍
• 聚合物纳米胶束（PN）使HepG2细胞的IC₅₀从0.32μM降至0.14μM
• 纳米制剂显著降低心脏毒性

安全性评估

毒理学研究显示：

• 1 mg/kg剂量连续给药36天未出现器质性损伤
• 纳米制剂组血清肌酐水平保持正常
• 对正常外周血单核细胞选择性毒性低

展望与挑战

尽管ARBU展现多靶点抗癌潜力，但仍需解决：

• 11β-OH和12-OH活性基团的构效关系
• 血脑屏障穿透特性导致的神经毒性风险
• 开展临床转化研究验证其治疗窗口

现有证据表明，ARBU通过调控肿瘤微环境中胆固醇代谢（PCSK9/LDL-R通路）和免疫细胞极化，为开发"一药多靶"抗癌药物提供了新思路。未来研究应聚焦于其异构体活性差异和精准递送系统的优化。