链霉菌DG19降解生物材料的机制与应用:解聚活性、基因组挖掘及土壤埋藏评估

【字体: 时间:2025年07月02日 来源:Biotechnology for the Environment

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  为解决塑料污染问题,研究人员以链霉菌Streptomyces microflavus DG19为对象,系统研究了其对聚羟基脂肪酸酯(PHBV)、聚己内酯(PCL)等生物材料的降解能力。通过基因组分析发现新型PHB解聚酶(SmPHBase),土壤埋藏实验证实其可使PHBV薄膜7天内失重96%,多层消费品失重48%。该研究为生物塑料的微生物回收和升级循环提供了专业解决方案。

  

塑料污染已成为全球性环境挑战,传统塑料在自然环境中需数百年才能降解,而生物基塑料虽被寄予厚望,但其降解效率与机制仍不明确。尤其令人担忧的是,目前仅有9%的塑料被回收,约50%最终填埋。在此背景下,寻找高效降解微生物并解析其分子机制,对实现塑料废弃物的可持续管理至关重要。

来自塞尔维亚贝尔格莱德大学等机构的研究团队在《Biotechnology for the Environment》发表论文,首次全面评估了链霉菌Streptomyces microflavus DG19对多种生物材料的降解能力。研究发现该菌株能在7天内降解96%的PHBV薄膜,对PCL和纤维素也表现出显著活性。通过基因组测序鉴定出含特殊底物结合域的PHB解聚酶SmPHBase,并发现>30个生物合成基因簇。土壤埋藏实验进一步证实其作为堆肥增强剂的潜力,为生物塑料的循环利用提供了新思路。

研究采用四项关键技术:1) 琼脂平板筛选法评估菌株对PHBV、PCL等生物材料的降解活性;2) 液体培养结合傅里叶变换红外光谱(FTIR)分析材料结构变化;3) 全基因组测序(Illumina NovaSeq X平台)与antiSMASH分析生物合成基因簇;4) 模拟土壤埋藏实验(ASTM D5338-15标准)测试实际应用效果。菌株分离自爱尔兰受塑料污染的森林土壤(53.41991°N, 7.88762°W)。

降解活性评估
通过琼脂平板实验发现,DG19在PHBV平板上15天形成55 mm透明圈,PCL为27 mm。液体培养中PHBV薄膜7天失重96%,PCL 15天失重10%。FTIR显示PHBV的1720 cm-1羰基峰强度降低,表明酯键断裂。菌株能利用3-羟基丁酸(3-HB)和乳酸,但不能代谢6-羟基己酸(6-HHx),这与PCL降解效率较低的现象一致。

基因组特征
8.4 Mbp基因组含71.33% GC含量,预测到7640个基因。KEGG分析显示丰富的碳水化合物代谢基因(283个),特别是丁酸(24个)和丙酸代谢通路(26个)。通过dbCAN鉴定出4种胞外纤维素酶,包括含碳水化合物结合模块(CBM)的1,4-β-纤维二糖苷酶,解释了其纤维素降解能力。

PHB解聚酶发现
鉴定出445 aa的SmPHBase,与Streptomyces ascomycinicus解聚酶有71%相似性。AlphaFold结构预测显示其含催化域(Ser142-His280-Asp220三联体)和独特的底物结合域(富含苏氨酸19%)。系统发育分析表明该酶与放线菌门典型解聚酶亲缘较远,其底物结合域含16%非保守氨基酸,可能影响底物特异性。

土壤埋藏应用
在接种DG19孢子的土壤中,PHBV薄膜1个月失重47%,PHB涂层纸杯失重48%,普通纸杯达60%。FTIR显示处理组在1560 cm-1出现羧酸根特征峰,证实降解发生。相比之下,PHBH名片仅失重9%,表明其对长链PHA降解能力有限。

次级代谢潜力
antiSMASH分析发现32个生物合成基因簇,包括产生烷基间苯二酚(抗菌剂)和萘黄酮(抗氧化剂)的基因簇,提示该菌株在降解同时可合成高值化合物,提升循环经济可行性。

这项研究首次系统解析了链霉菌DG19降解生物材料的分子机制与应用潜力。发现的SmPHBase解聚酶具有独特底物结合域,为酶工程改造提供了新靶点。土壤实验证实其作为堆肥增强剂的实用性,特别是在处理PHB基多层材料方面表现突出。基因组揭示的丰富次级代谢基因簇,更赋予其"降解-转化"的双重价值。该成果为生物塑料的微生物降解提供了理论依据和技术储备,对发展可持续的塑料废弃物管理策略具有重要意义。研究也存在一定局限,如对PCL的降解效率较低,未来可通过蛋白工程优化解聚酶特性,或构建合成微生物群落提升综合降解能力。

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