Fas与自噬通路双重抑制在P23H小鼠模型中协同保护光感受器的神经保护作用

本研究针对P23H突变导致的常染色体显性视网膜色素变性（adRP），通过联合抑制Fas受体和自噬通路，显著延缓了光感受器（PR）退化。研究人员采用遗传学（Lpr/P23H小鼠）和药理学（ONL1204联合羟氯喹HCQ）双重策略，证实双重干预可减少细胞凋亡、降低炎症反应，并改善视网膜功能。该研究为多靶点治疗遗传性视网膜疾病提供了新思路。

　　

视网膜色素变性（Retinitis Pigmentosa, RP）是一种遗传性致盲疾病，其中P23H视紫红质（RHO）突变是常见病因。这种突变导致蛋白质错误折叠，引发内质网应激并激活多条细胞死亡通路，包括自噬（autophagy）和Fas介导的凋亡。尽管此前研究发现单独抑制Fas或自噬可延缓光感受器退化，但两种通路的交互作用及联合干预效果尚不明确。这一科学问题促使密歇根大学的研究团队开展深入研究，相关成果发表在《Cell Death and Disease》上。

研究团队采用多学科方法：通过基因工程构建Fas缺陷的Lpr/P23H小鼠模型，结合药理学手段（羟氯喹抑制自噬、ONL1204阻断Fas受体）；利用光学相干断层扫描（OCT）和视网膜电图（ERG）动态监测视网膜结构与功能；通过TUNEL染色、 caspase-8活性检测评估细胞死亡；采用免疫荧光和qPCR分析炎症因子表达。所有动物实验均遵循ARVO伦理规范。

HCQ在Lpr/P23H小鼠中增强光感受器保护
遗传学证据显示，Fas缺陷型Lpr/P23H小鼠的视网膜外核层（ONL）厚度显著优于P23H对照组。联合羟氯喹治疗后，TUNEL阳性细胞进一步减少（图1A-B），caspase-8活性降低（图1C），证实双重干预可协同抑制凋亡。OCT显示治疗组在4月龄时仍保留更多光感受器（图2A-D）。

炎症微环境调控
免疫组化显示，联合治疗显著减少ONL中Iba1⁺小胶质细胞浸润（图3A-B），并下调炎症因子CCL2的转录水平（图3C），表明双重干预可改善视网膜免疫微环境。

视网膜功能改善
ERG检测发现，羟氯喹处理的Lpr/P23H小鼠暗适应a/b波振幅显著提高（图4B-C），免疫荧光显示视紫红质和视锥蛋白表达增强（图4A），提示视觉信号传导功能得到保留。

药理学双重干预的验证
在野生型P23H小鼠中，ONL1204（Fas抑制剂）联合羟氯喹同样减少TUNEL阳性细胞（图5B-C），维持ONL厚度（图6A-C），并抑制Iba1⁺细胞活化（图7A-C）。ERG证实联合治疗组明/暗适应反应均优于对照组（图8B-E）。

该研究首次证实：在P23H-RHO模型中，Fas与自噬通路存在协同致病机制。双重干预通过以下途径发挥作用：（1）减少caspase-8依赖的凋亡；（2）缓解自噬过度激活导致的蛋白质稳态失衡；（3）调控小胶质细胞介导的神经炎症。这种多靶点策略为遗传性视网膜疾病的广谱治疗提供了新范式，尤其对300余种不同基因突变导致的视网膜变性具有潜在普适性。

临床转化方面，羟氯喹（已获批用于其他适应症）与ONL1204（目前处于AMD/青光眼临床试验阶段）的组合具有较高可行性。但需注意羟氯喹的视网膜毒性风险，以及不同突变类型中自噬通路的异质性。未来研究可拓展至其他IRDs模型，并优化给药方案以平衡疗效与安全性。