基于仿生化疗药物清除剂的联合疗法治疗三阴性乳腺癌

为解决三阴性乳腺癌(TNBC)化疗药物阿霉素(Dox)剂量限制性毒性问题，温州医科大学团队开发了一种正常组织靶向的仿生化疗药物清除剂(CDS)。该研究通过封装GC-rich DNA并修饰红细胞膜，实现了Dox在健康器官的选择性中和，使Dox剂量提升至15 mg/kg（常规3倍）。实验表明，CDS保护下的高剂量Dox联合手术/放疗可显著抑制术后残留/转移瘤，并通过诱导G2/M期阻滞增强放疗敏感性。此外，该策略还能重塑肿瘤微环境(TME)，促进T细胞/树突状细胞(DCs)/巨噬细胞(M1)浸润，为TNBC联合治疗提供新范式。

　　

三阴性乳腺癌(TNBC)因缺乏雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER2)表达，对激素和靶向治疗不敏感，化疗成为主要选择。阿霉素(Dox)虽对TNBC有效，但其心脏毒性等副作用限制了剂量提升，导致单药响应率仅40-50%。更棘手的是，Dox与手术、放疗或免疫治疗的协同效应常因剂量不足而难以发挥——例如Dox诱导的G2/M期阻滞可增强放疗敏感性，免疫原性细胞死亡(ICD)能激活抗肿瘤免疫，但低剂量Dox无法充分实现这些效应。如何安全提高肿瘤内Dox浓度，成为解锁其联合治疗潜力的关键。

温州医科大学的研究团队在《Journal of Nanobiotechnology》发表研究，提出了一种革命性的解决方案：通过仿生化疗药物清除剂(CDS)选择性中和健康器官中的Dox，突破剂量限制。该策略使Dox剂量提升至15 mg/kg（常规3倍），在4T1小鼠TNBC模型中展现出显著疗效。研究证实，高剂量Dox联合手术可抑制早期/晚期肿瘤术后复发转移；通过增强G2/M期阻滞，仅需2 Gy低剂量放疗即可增效；还能重塑"冷"肿瘤微环境为"热"状态，促进T细胞、树突状细胞(DCs)和M1型巨噬细胞浸润，为后续免疫治疗奠定基础。

研究采用三项关键技术：1) 构建GC-rich DNA/鱼精蛋白复合物模拟细胞核结构，通过静电作用封装于经正常组织靶向(NTT)肽修饰的红细胞膜囊泡中，形成粒径400 nm的CDS；2) 建立4T1-Luc原位乳腺癌小鼠模型，通过生物发光成像确定肿瘤早期(10天)和晚期(22天)分期；3) 联合治疗评估体系，包括术后残留瘤体积监测、流式细胞术检测免疫细胞浸润、Masson染色分析胶原含量及ELISA检测细胞因子(IFN-γ/TNF-α/IL-2)。

结果与讨论
CDS的制备与表征
通过将GC-rich DNA（Dox优先结合靶点）封装于NTT肽修饰的红细胞膜，构建的CDS在H9C2心肌细胞中展现出剂量依赖性Dox中和能力（1 mg/mL完全解毒）。体内实验显示CDS特异性富集于心脏、肝脏和股骨，肿瘤分布极少，这种不对称分布使其在不影响肿瘤杀伤的同时保护正常器官。

联合手术的疗效提升
在4T1原位瘤不完全切除模型中，CDS预处理使Dox-15组术后残余瘤体积较Dox-5组减少50%。值得注意的是，晚期肿瘤(术后22天)治疗中，CDS+Dox-15组小鼠生存率达100%，而Dox-15单独组80%死亡。转移灶抑制实验显示，高剂量Dox对肺/肝转移同样有效，证实CDS未削弱Dox抗肿瘤活性。

放疗增敏机制
体外实验证实2.418 μM Dox可使4T1细胞G2/M期比例增加3倍（流式细胞术验证），CDK1表达上调（免疫荧光标记）。体内联合2 Gy放疗时，CDS+Dox-15组肿瘤抑制率较单用Dox提高40%，组织学显示显著坏死和γ-H2AX标记的DNA损伤，证实低剂量放疗的协同效应。

免疫微环境重塑
Masson染色显示CDS+Dox-15组肿瘤胶原含量降低60%，伴随IFN-γ表达上调（荧光显微镜）。ELISA检测到TNF-α和IL-2水平升高3倍，流式证实DiD标记的CTLL-2（T细胞）、JAWSII（DCs）和M1型RAW264.7细胞在肿瘤内浸润增加2-4倍，为后续过继性细胞治疗提供有利条件。

该研究创新性地通过仿生解毒策略突破化疗剂量瓶颈，首次实现Dox在手术、放疗和免疫治疗中的全链条协同增效。CDS的设计巧妙之处在于：1) 利用GC-rich DNA竞争性结合Dox，模拟细胞核解毒机制；2) NTT肽引导的器官靶向避免肿瘤干扰；3) 红细胞膜延长体内循环时间。这些发现不仅为TNBC联合治疗提供新工具，更开创了"靶向解毒"增强传统药物效能的研发范式，具有重要临床转化价值。