UBE3C作为突变型BRAFV600E的E3泛素连接酶：克服Vemurafenib耐药的新靶点

本研究针对BRAFV600E突变癌症患者面临的Vemurafenib耐药难题，通过串联亲和纯化技术发现UBE3C特异性结合BRAFV600E激酶域并促进其泛素化降解，揭示HSP90-UBE3C-BRAFV600E调控轴可作为克服继发耐药的新靶点，为BRAF突变肿瘤治疗提供创新策略。

　　

在癌症治疗领域，BRAF^V600E突变犹如一把双刃剑——它既是明确的治疗靶点，又是耐药性滋生的温床。这种在黑色素瘤中占比高达60%的突变，虽能被Vemurafenib等抑制剂精准打击，但患者往往在用药6-7个月后遭遇治疗瓶颈。耐药性的幽灵始终徘徊在靶向治疗的上空，其背后机制如同错综复杂的迷宫，涉及NRAS突变、BRAF扩增等多重逃逸路径。更棘手的是，科学界对BRAF^V600E蛋白本身的稳定性调控知之甚少，这就像试图修理一台没有图纸的精密仪器。

来自韩国首尔的研究团队将探针指向了蛋白稳态系统。他们发现E3泛素连接酶UBE3C这个"分子雕刻师"能特异性识别BRAF^V600E的异常结构，通过HECT结构域为其贴上泛素"死亡标签"。这项发表在《Life Sciences》的研究犹如打开了一扇新窗：当用HSP90抑制剂打破分子伴侣的保护罩时，UBE3C对BRAF^V600E的降解作用显著增强，这为破解耐药困局提供了双重保险——既可直接抑制突变蛋白功能，又能加速其清除。

研究采用串联亲和纯化钓取BRAF^V600E互作蛋白，结合体外泛素化实验验证UBE3C的催化活性，并通过293T细胞系和黑色素瘤患者来源模型（包括A375、SK-MEL-2等细胞）进行功能验证。热休克蛋白抑制剂17-AAG的处理实验揭示了HSP90在维持突变蛋白稳定性中的关键作用。

UBE3C与BRAF^V600E的显著关联
研究者从蛋白酶体抑制剂MG132处理实验入手，发现BRAF^V600E的泛素化修饰存在特异性模式。免疫共沉淀实验显示UBE3C能直接结合BRAF^V600E激酶域，这种相互作用在耐药细胞株中更为显著。体外重构实验证实UBE3C可介导K48连接的多泛素链形成，这种修饰类型通常引导蛋白走向降解。

讨论与结论
该研究首次绘制出UBE3C-HSP90-BRAF^V600E调控网络的三维图谱。UBE3C作为"分子质量检查员"，能识别突变导致的BRAF构象变化；而HSP90则像"蛋白保镖"，通过维持错误折叠蛋白的溶解性来对抗UBE3C的降解作用。这种动态平衡的打破，可能解释为何HSP90抑制剂能增强Vemurafenib敏感性。

更重要的是，UBE3C的调控谱系不仅限于BRAF^V600E，还涵盖其他耐药相关突变体，这为开发广谱耐药逆转剂提供了理论支点。研究者Do Yeon Kim等提出的"E3连接酶调控剂联合疗法"概念，或将引领下一代靶向药物的研发方向——不再单纯抑制靶点，而是重塑整个蛋白稳态网络。这项发现对占癌症患者10%的BRAF突变群体具有特殊价值，特别是那些面临"用药-耐药-换药"恶性循环的黑色素瘤患者。